افزایش تولید آنتی بیوتیک کلاولانیک اسید با ایجاد گونه های استرپتومایسس کلاولی جروس تراریخت واجد ژن claR

کلاولانیک اسید از جمله آنتی بیوتیک های مهار کننده ی β لاکتاماز بوده که توسط استرپتومایسس کلاولی جروس تولید می شود. کلاولانیک اسید در ترکیب با سایر آنتی بیوتیک های قوی و حساس به β لاکتاماز مورد استفاده بالینی قرار می گیرد. ژن CalR از جمله ژن هایی بوده که نقش مهمی در تنظیم تولید کلاولانیک اسید ایفا نموده و به منظور بیان ژن های اواخر مسیر بیوسنتز کلاولانیک اسید مورد نیاز است. کانسترک نوترکیب pMTclaR حاوی ژن تنظیمی claR از دانشگاه اصفهان تهیه و به منظور استفاده، از سویه استرپتومایسس لیویدنس با استفاده از روش لیز قلیایی استخراج شد. به منظور انجام ترانسفورماسیون پروتوپلاست از باکتری استرپتومایسس کلاولی جروس تهیه و در مرحله بعد با استفاده از پلی اتیلن گلایکول در سویه استرپتومایسس کلاولی جروس ترانسفورم شد. با استفاده از استخراج پلاسمید و انجام PCR ترانسفورماسیون تایید شد. در نهایت به منظور بررسی نحوه تاثیر ژن claR اضافه شده از روش بایواسی استفاده شد.
کلونی های گچی حاصل از رشد استرپتومایسس کلاولی جروس ترانسفورم شده بر روی محیط GYME حاوی آنتی بیوتیک مشاهده شد که تایید انجام ترانسفورماسیون است. از سویه ترانسفورم شده پلاسمید استخراج و ساختار آن توسط ژل الکتروفورز تایید شد. با استفاده از پلاسمید استخراج شده و پرایمرهای اختصاصی claR واکنش PCR انجام و باند 1334 جفت بازی مشاهده شد. در نهایت با انجام روش بایواسی و مشاهده ی هاله عدم رشد در نمونه ترانسفورم شده و مقایسه آن با نمونه کنترل مشخص شد که حضور پلاسمید نوترکیب سبب افزایش 3/3 برابری تولید کلاولانیک اسید در سویه استرپتومایسس کلاولی جروس شده است.
در مطالعه حاضر، با انتقال پلاسمید نوترکیب حاوی ژن claR میزان تولید آنتی بیوتیک کلاولانیک اسید تا 5/2 برابر افزایش یافت. با توجه به اهمیت دارویی کلاولانیک اسید ایجاد سویه هایی که توانایی تولید بیشتر کلاولانیک اسید را داشته باشند می توانند به بومی سازی تولید آنتی بیوتیک کلاولانیک اسید با صرفه اقتصادی بیشتر درمقیاس صنعتی کمک شایانی نماید.