بررسی توالی نوکلئوتیدی ژن ethA در سویه های حساس و مقاوم به اتیونامید در باکتری مایکوباکتریوم توبرکلوزیس

اتیونامید (ETH) یک آنالوگ ساختاری از ایزونیازید و از داروهای خط دوم در درمان بیماری سل می باشد. اتیونامید و ایزونیازید پروتئین INHA را در باکتری مایکوباکتریوم توبرکلوزیس (MTB) هدف قرار می دهند. این پروتئین در بیوسنتز اسیدمایکولیک دیواره نقش دارد. هدف از این مطالعه بررسی ترادف ژن ethA به منظور شناسایی موتاسیون های مرتبط با مقاومت به اتیونامید در مایکوباکتریوم توبرکلوزیس است.
در این مطالعه توالی نوکلئوتیدی در 27 سویه کلینیکی مایکوباکتریوم توبرکلوزیس مقاوم و حساس به اتیونامید مورد ارزیابی قرار گرفت. با توجه به طویل بودن قطعه (1470 bp) جهت تعیین ترادف کامل ژن، از مجموعه پرایمرهای اختصاصی 10-ethA، 8-ethA، 9-ethA، 4-ethA، 5-ethA، 1- ethAبرای تولید سه قطعه ای که همپوشانی دارند در واکنش PCR، استفاده شد. به ازای هر نمونه سه واکنش PCR با پرایمرهای اختصاصی 10-ethA، 8-ethA، 9-ethA، 4-ethA، 5-ethA، 1- ethA اجرا شد.
از 27 سویه مورد بررسی، 23 سویه مقاوم به اتیونامید و 4 سویه حساس به دارو بودند. نتایج الکتروفورز نشان دهنده ی انتخاب مناسب پرایمرها و برنامه PCR بود. نتایج تعیین توالی، رخداد موتاسیون را در نقاط مختلف ژن، در سویه های مقاوم مورد مطالعه اثبات کرد. سویه های حساس نیز همگی فاقد موتاسیون بودند.
نتایج این مطالعه نشان داد که هرگونه جهش در هر نقطه از ژن ethA میتواند منجر به مقاومت به اتیونامید شود. تشخیص مولکولی سریع مقاومت از طریق توالی یابی کل ژن امکان پذیر است.