اثر استرادیول بر بیان ژن آنزیم های استروژنیک و پروژستژانیک در سلول های گرانولوزا گاو هلشتاین در شرایط برون تنی

هدف از مطالعه حاضر بررسی تاثیر استرادایول بر بیان نسبی ژن های گیرنده (FSH (FSHR، گیرنده (LH (LHRو آنزیم های استروژنیک و پروژستاژنیک (Progestagenic) در سلول های گرانولوزای کشت داده شده گاو هلشتاین بود. به طور خلاصه، فولیکول های دو تا پنج میلی متری از تخمدان گاوهای بالغ از کشتارگاه جمع آوری شدند، پس از جدا کردن سلول های گرانولوزا در محیط DMEM/F12 به مدت شش روز در در پلیت هایی 24 تایی کشت داده شدند و به منظور شمارش تعداد سلول ها از رنگ تریپان بلو 0/4 درصد استفاده شد. تیمارها شامل 1) 500 هزار سلول گرانولوزا در ml 500 محیط کشت، 2) 500 هزار سلول گرانولوزا در ml 200 محیط کشت،3) 500 هزار سلول گرانولوزا در ml 500 محیط کشت و استرادیول 4) 500 هزار سلول گرانولوزا در ml 200 محیط کشت و استرادیول بودند. برای اندازه گیری استرادیول محیط های کشت در روز شش جمع آوری شدند بر اساس روش رادیوایمونواسی (RIA)، غلظت استرادیول اندازه گیری شد. سلول ها بوسیله ترایزول جمع آوری شدند و تا زمان استخراج RNA در 80- درجه سانتیگراد نگهداری شدند. داده ها با استفاده از نرم افزار JMP مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. نتایج نشان داد افزودن استرادیول به محیط کشت سلول های گرانولوزای گاو، از یک سو با افزایش بیان ژن آنزیم های کلیدی در تبدیل اندروژن به استرادیول (آنزیم های استروژنیک) غلظت استرادیول تولید شده به وسیله سلول های گرانولوزا را افزایش داد. از سوی دیگر مسیر ساخت پرژوسترون را با کاهش بیان ژن آنزیم های کلیدی در تبدیل کلسترول به پروژسترون (آنزیم های پروژستژانیک) مهار کرد و در نهایت سبب کاهش لوتئینه شدن و بهبود سلامت فولیکول شد.