اثر تعداد سلولهای گرانولوزا در محیط کشت در بیان ژن آنزیمهای موثر در ساخت هورمونهای استروییدی

سلول های گرانولوزا دارای نقشی کلیدی در مسیر استروئیدوژنسیز هستند.
از مطالعه حاضر بررسی تراکم سلول های گرانولوزا کشت داده شده حاصل از فولیکول های mm 5-2بر تراوش استرادیول و بیان ژن های مرتبط با ساخت استرادیول و پروژسترون بود.
به طور خلاصه، فولیکول های mm 5-2 از تخمدان گاوهای بالغ از کشتارگاه جمع آوری شدند، پس از جدا سازی و شمارش سلول ها با استفاده از رنگ تریپان بلو 4/0 %، سلول های گرانولوزا در محیط DMEM/F12 به مدت شش روز کشت داده شدند. تیمارها شامل 1) 500 هزار سلول در mL 500 محیط کشت، 2) 500 هزار سلول در mL 200 محیط کشت، 3) 250 هزار سلول در mL 500 محیط کشت و 4) 250 هزار سلول در mL 200 محیط کشت بود. داده های مربوط به بیان ژن ها با استفاده از نرم افزار JMP مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند.
در شرایطی که مقدار محیط کشت ثابت بود کاهش تعداد سلول ها (کاهش تراکم) منجر به افزایش غلظت استرادیول گردید و در شرایطی که تعداد سلول ها ثابت بود کاهش محیط کشت (افزایش تراکم) سبب کاهش غلظت استرادیول گردید. میزان پروتئین و RNA استخراجی تفاوتی بین تیمارها نداشت. با کاهش تراکم بیان ژن های FSHR، CYP19، 17βHSD افزایش و بیان ژن های GADD45β و StAR کاهش یافت. نتایج مطالعه حاضر نشان داد کاهش تراکم سلول سبب افزایش تولید استرادیول و همچنین افزایش mRNA کد کننده آنزیم های استروژنیک گردید ولی بالعکس سبب کاهش بیان mRNA کد کننده آنزیم های پروژستژنیک (Progestagenic) گردید.
نتیجه گیری نهایی: غلظت پروتئین با کاهش تراکم سلول تغییر نکرد در نتیجه می توان سلول را از اثرات مضر افزایش تراکم محافظت کرد.