بیان آنتی بادی تک دودمانی ضد HER2/neu انسانی Trastuzumab در توتون تراریخته

سرطان پستان شایع ترین نوع سرطان در میان زنان است و سالانه بیش از نیم میلیون زن به این بیماری مبتلا می شوند.Trastuzumab (با نام تجاری Herceptin®) یک آنتی بادی تک دودمانی انسانی شده مشتق از تکنولوژی DNA نوترکیب است که در درمان سرطان پستان متاستاتیک مورد استفاده قرار می گیرد. با این حال، درمان باTrastuzumab هزینه بسیار زیادی داشته و یک دوره درمان یکساله برای بیمار نیاز به صرف هزینه بیش از 200 میلیون تومان دارد. در این تحقیق امکان تولید آنتی بادی Trastuzumab در گیاه توتون با استفاده از تراریختی پایدار به واسطه Agrobacterium tumefaciens بررسی شد. ریزنمونه های برگ توتون رقم Gewone groene با آگروباکتریوم سویه LBA4404 حاوی وکتورهای دوتایی pBIN19-NTopTras-LC و pBIN19-NTopTras-HC، دربردارنده به ترتیب ژن های رمز کننده زنجیره سبک (LC) و زنجیره سنگین (HC) آنتی بادی Trastuzumab، تلقیح شدند. تجزیه لکه گذاری سادرن درج یک الی سه نسخه از ژن های HC و LC در ژنوم گیاهان تراریخته را تایید کرد. بیان تراژن ها در سطح RNA با تجزیه RT-PCR نیمه کمی مورد تایید قرار گرفت. تجمع پروتئین در گیاهان با تجزیه لکه گذاری وسترن مشخص شد و محتوی آنتی بادی در گیاهان تراریخته 1/ 0 درصد پروتئین محلول کل برآورد شد. تجزیه ایمونوبلات عصاره خام گیاهان نشان داد کهTrastuzumab در گیاهان به شکل تترامر (H2L2) تجمع می یابد. تجزیه نتاج T1 وراثت پایدار و تفکیک همزمان تراژن ها به صورت یک مکان ژنی منفرد مندلی را تایید کرد. نتایج این تحقیق نشان داد که گیاهان می توانند به عنوان یک سامانه جایگزین برای تولید مقرون به صرفه پروتئین های دارویی با ارزش بالا مورد استفاده قرار گیرند. این مطالعه، برای اولین بار در کشور، گام نخست اساسی به سمت توسعهTrastuzumab گیاهی را پیشنهاد می کند.