تشخیص سریع ویروس لارینگو تراکئیت عفونی (ILTV) با استفاده از روش مولکولی Real-time PCR مبتنی بر ژن اختصاصی UL27

ویروس لارینگو تراکئیت عفونی (ILTV)، از مهمترین عوامل بیماریزا از نظر اقتصادی در صنعت طیور است. ماکیان تنها مخزن اصلی این ویروس به حساب می آیند. این عامل، یک سندرم حاد تنفسی و نسبتا شایع در مرغان تخمگذار و بویژه مرغان مادرگوشتی ایجاد می کند که باعث کاهش تولید تخم مرغ و افزایش تلفات در آنها می شود. با توجه به اینکه در حال حاضر متاسفانه هنوز یک روش سریع، حساس و دقیق برای تشخیص این ویروس وجود ندارد، لذا هدف ما در این پژوهش، ارزیابی و معرفی یک روش دقیق مولکولی با استفاده از تکنیک Real-time PCR و مبتنی بر ژن اختصاصی UL27 ویروس ILT، به منظور تشخیص سریع این ویروس می باشد.
در این مطالعه، پس از تهیه نمونه ویروسی، DNA مربوطه با استفاده از کیت استخراج اسیدهای نوکلئیک از ویروس استخراج گردید. سپس حضور ژن اختصاصی UL27 ویروس، ابتداءا با تکنیک PCR معمولی با استفاده از پرایمرهای اختصاصی و در نهایت با تکنیک Real-time PCR با استفاده از پرایمرها و پروب اختصاصی مربوطه، مورد ارزیابی قرار گرفت.
مشاهده قطعه مورد انتظار 96 جفت بازی در آنالیز ژل الکتروفورز، حضور ژن اختصاصی UL27 را در این نمونه های ویروسی تایید کرد و نتایج ارزیابی سنجش Real-time PCRنیز بر روی نمونه های فوق مثبت بود.
این مطالعه نشان داد که روش مولکولی Real-time PCRروش مناسبی برای تشخیص سریع و دقیق ویروس لارینگو تراکئیت عفونی، بواسطه ی ردیابی ژن اختصاصی UL27 می باشد.