غربالگری منطقه جزئی کد کننده ژن ایزوفرم-2 متالوتیونین در گاو کوهان دار

متالوتیونین به دلیل عملکرد خود در اتصال محکم به فلزات سنگین در کاهش سمیت آن ها مهم می باشد. DNA از 30 گاو کوهان دار در معرض فلز سمی و 30 گاو بدون مواجهه با فلز سمی جدا شد. محصول تکثیر شده واکنش زنجیره ای پلیمراز ایزوفرم-2 متالوتیونین (MT-2) (bp 489) برای PCR-RFLP و تعیین توالی DNA مورد استفاده قرار گرفت. PCR-RFLP MP-2 TaqI ژنوتیپ هموزیگوت (AA) به جز حیوان E23 (AB) را تایید نمود. فراوانی ژنوتیپ AA و AB (E23) در گروه های مواجهه به ترتیب 967/0 و 033/0 بود. تعیین توالی DNA برای نمونه در معرض فلز سمی (E23) و نمونه گروه کنترل (C13) انجام شد. سپس مقایسه های BLAST توالی ها مقابل پایگاه داده های توالی نوکلئوتیدی هم تراز شدند که 150 جایگزینی نوکلئوتیدی شامل 70 جایگزینی همجنس و حدود 80 جایگزینی ناهمجنس را تایید نمود. PCR-RFLP متعاقب تعیین توالی DNA برای MT-2 تعداد بیشتری از جایگزینی های نوکلئوتیدی (150) برای ژنوتیپ AB را در مقایسه با ژنوتیپ AA (38) E21 تایید کرد. نسبت های جهش های متقاطع یا ناهمجنس در ژنوتیپ AB در مقایسه با ژنوتیپ AA MT-2 بیشتر بودند. تعیین توالی DNA برای E21 و C13 بر اساس نمونه گیری تصادفی انجام شد. آنالیز هم ترازی نمونه E21 و C13، 38 جایگزینی نوکلئوتیدی شامل تعداد مساوی جایگزینی های همجنس و ناهمجنس را تایید کرد. آنالیز BLAST توالی جزئی شناسایی شده 89% شباهت با Bos tarsus، 85% شباهت با گوسفند، 98% شباهت با بوفالو و 100% شباهت با توالی MT-2 بز را تایید نمود. یافته های کلی مطالعه حاضر تنوع توالی DNA در قطعه کد کننده ژن MT-2 گاو کوهان دار را تایید کردند که می تواند برای تعیین مشخصات و شناسایی شاخص هایی برای هومئوستاز فلز سنگین در گاو کوهان دار مورد استفاده قرار گیرد.