تولید و کاربرد کونژوگه پراکسیداز آنتیبادی مونوکلونال به منظور تشخیص IgG مرغی توسط ELISA

عفونت های ویروسی عامل خسارت های اقتصادی بسیار زیادی در صنعت طیور هستند. تولید مواد و کیت های تشخیص سرولوژیک مناسب به کنترل این عفونت ها کمک خواهد نمود. هدف از مطالعه ی حاضر تهیه یک آنتی بادی نشاندار شده با پراکسیداز ضد IgG مرغ، با استفاده از یک آنتی بادی منوکلونال ضد IgG مرغ (5B8)، برای ردیابی آنتی بادی های مرغ در الیزا بود. برای این منظور تیره سلول هیبریدومای تولید کننده ی آنتی بادی مونوکلونال 5B8 در محیط RPMI 1640 کشت داده شد و آنتی بادی منوکلونال با استفاده از یک ستون حاوی سفارز حساس شده با IgG مرغ از مایع رویی سلول ها خالص شد. آنتی بادی خالص شده با روش پریودات با آنزیم پراکسیداز نشاندار گردید. آنتی بادی منوکلونال نشاندار شده با پراکسیداز از نظر شناسایی آنتی بادی ضد نوکلئوپروتئین ویروس آنفلونزا در الیزا با یک آنتی بادی پلی کلونال تجاری مقایسه گردید. بنابر این نوکلئوپروتئین ویروس آنفلونزا تیپ A به عنوان آنتی ژن و سرم های تهیه شده از مرغ های سالم و مرغ های آلوده به ویروس آنفلوآنزا به عنوان آنتی بادی اولیه مورد استفاده قرار گرفتند. نتایج بدست آمده نشان داد که یک همبستگی قوی و مستقیم (r =0.972) بین دانسیته های نوری آنتی بادی تجاری ضد IgG مرغ و آنتی بادی نشاندار شده وجود دارد. در نتیجه آنتی بادی منوکلونال نشاندار شده برای طراحی کیت های تشخیص سرمی طیور مناسب می باشد.