بررسی مقایسه ای شناسایی شیگلا فلکسنری از طریق روش رنگ سنجی بر پایه نانوذرات طلا و الکتروفورز

شیگلا باسیل گرم منفی روده ای است که عفونت های ناشی از آن مشکلات جدی را در کشورهای پیشرفته و در حال توسعه ایجاد کرده است. هدف از این مطالعه، به کارگیری روش رنگ سنجی بر پایه نانوذرات طلا جهت تشخیص سریع شیگلا فلکسنری با استفاده از محصول تکثیریافته ژن ipaH است.
در این مطالعه برای شناسایی جنس شیگلا از یک جفت آغازگر اختصاصی برای تکثیر ژن ipaH به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز استفاده شد. سپس از پروب تک رشته ای، جهت اتصال به نواحی اختصاصی محصول این واکنش استفاده شد. در مرحله بعد نانوذرات طلا به مخلوط واکنش افزوده شدند و تغییر رنگ محلول به صورت چشمی و با استفاده از میکروسکوپ الکترونی روبشی بررسی شد. جهت بررسی حساسیت این روش، از محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز با رقت های مختلف استفاده شد و نتایج با روش ژل الکتروفورز مقایسه شد.
هیبریداسیون پروب با محصول تکثیریافته از ژن ipaH باعث تجمع نانوذرات طلا به شکل شبکه ای متصل به هم شد و درنتیجه منجر به تغییر رنگ مخلوط واکنش از قرمز به بنفش شد که این تغییر رنگ نشان دهنده وجود باکتری شیگلا فلکسنری در نمونه بود، درحالی که هیچ تغییر رنگی در موارد کنترل منفی مشاهده نشد. همچنین تجمع نانوذرات طلا با استفاده از تصویر میکروسکوپ الکترونی روبشی تایید شد.
به دلیل اختصاصی بودن ژن ipaH در گونه شیگلا فلکسنری، روش رنگ سنجی بر پایه نانوذرات طلا می تواند به عنوان روشی سریع و کاربردی با حساسیت بالا، برای شناسایی اختصاصی این باکتری در نمونه های بالینی و مواد غذایی استفاده شود.