بررسی اثر عصاره گیاهی برگ انجیر برفعالیت ماتریکس متالوپروتئینازهای (MMPs) در کشت سلول های فیبروبلاست (HEP2)

هدف از این مطالعه، بررسی اثر مهاری عصاره ی برگ انجیر (Ficus Carica) بر فعالیت ماتریکس متالوپروتئینازها و در نتیجه ممانعت از تکثیر و متاستاز سلول های توموری، در کشت سلول فیبروبلاست (HEP2) است. به این منظور، عصاره ی برگ انجیر به سه شکل آبی، آبی - الکلی و الکلی تهیه شد. با استفاده از پلیت های 24 خانه ای کشت سلول حاوی رده ی سلولی فوق، به ترتیب مقادیر μl 5 عصاره ی آبی (غلظت نهایی 5/0 درصد)، μl 10 عصاره ی آبی (غلظت نهایی 1 درصد)، μl 5 عصاره ی آبی – الکلی (غلظت نهایی 5/0 درصد)، μl 10 عصاره ی آبی – الکلی (غلظت نهایی 1 درصد)، μl 1 عصاره ی الکلی (غلظت نهایی 1/0 درصد) و μl 5 عصاره ی الکلی (غلظت نهایی 5/0 درصد) اضافه شد. برای هر گوده، یک گوده کنترل، با محتویات مشابه گوده تست اما فاقد عصاره، در نظر گرفته شد. سپس پلیت ها در گرمخانه کشت سلول گذاشته شدند و اثرات عصاره پس از گذشت 24، 48 و 72 ساعت، با استفاده از روش رنگ آمیزی تریپان بلو برای مشاهده سیتوتوکسیسیتی و روش زایموگرافی ژلاتین برای دیدن باندهای هضمی، مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج به دست آمده در بررسی با میکروسکوپ معکوس، نشان داد، عصاره ی الکلی به میزان 5 و 1 میکرولیتر به ترتیب پس از 24 و 48 ساعت به طور کامل موجب مرگ سلولی گردید. پس از گذشت 72 ساعت، مقدار μl 10 از عصاره ی آبی- الکلی برگ انجیر نیز، باعث مرگ سلول ها شد. در بررسی فعالیت آنزیم ها به روش زایموگرافی، در تمامی گوده های تست، اثر مهاری عصاره ی برگ انجیر بر فعالیت ماتریکس متالوپروتئینازها مشاهده شد. از طرفی در تمامی گوده های کنترل باند هضمی ایجاد شده با مقایسه با مارکر استاندارد مورد استفاده، وزن مولکولی MMP9 را نشان می داد. این بررسی اثر مهاری عصاره ی برگ انجیر بر فعالیت ماتریکس متالوپروتئینازها را تایید می کند. از این رو، توصیه می شود با استفاده از روش های مولکولی در کنار زایموگرافی و انجام مطالعات بالینی، به بررسی بیش تر اثر عصاره ی این گیاه بر انواع متالوپروتئینازها به طور جداگانه پرداخته شود.