Cloning of tagD gene from Helicobacter pylori in PFLAG-CMV-3 eukaryotic vector to generate a DNA vaccine
Abstract:
Background
Helicobacter pylori is strongly associated with inflammation of the stomach and is also implicated in the development of gastric malignancy, peptic ulcers and gastric lymphomas in humans. Tpx (thiolperoxidases) is encoded by the tagD gene and plays a significant role in colonize of H. pylori to stomachs. This gene stimulates the immune system in the host cells. The aim of this study was to isolate and cloning of tagD gene in the eukaryotic expression vector PFLAG-CMV-3 as a DNA vaccine candidate.
Material &
Methods
In this research, tagD gene (537 bp) was amplified by PCR. The PCR products were cloned by using cloning kits of Thermo Fisher Company in pTZ vector. This gene was Subcloned in the eukaryotic expression vector (PFLAG-CMV-3 vector), then transferred into CHO cells by electroporation method and finally was expressed.
Results
The results indicate that the gene amplification and cloning of tagD gene, was successful, and the pTZ-tagD vector was formed. PFLAG-CMV-3 Vector construction was confirmed by digestion and gene sequencing. The 19 kDa band was observed by gene expression analysis on SDS-PAGE.
Conclusions
tagD gene in the PFLAG-CMV-3-tagD recombinant vector has an ability to produce specific protein in CHO cells. Therefore, this gene construct is useful to evaluate the immunogenicity as a DNA vaccine against of the Helicobacter pylori infection in human.
Language:
Persian
Published:
Pars Journal of Medical Sciences, Volume:14 Issue: 4, 2017
Pages:
43 - 50
magiran.com/p1699508  
برخی از خدمات از جمله دانلود متن مقالات تنها به مشترکان مگیران ارایه می‌گردد. شما می‌توانید به یکی از روش‌های زیر مشترک شوید:
اشتراک شخصی
با عضویت و پرداخت آنلاین حق اشتراک یک‌ساله به مبلغ 700,000ريال می‌توانید 100 عنوان مطلب دانلود کنید!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی نامحدود همه کاربران به متن مطالب تهیه نمایند!
توجه!
  • دسترسی به متن مقالات این پایگاه در قالب ارایه خدمات کتابخانه دیجیتال و با دریافت حق عضویت صورت می‌گیرد و مگیران بهایی برای هر مقاله تعیین نکرده و وجهی بابت آن دریافت نمی‌کند.
  • حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران می‌شود.
  • پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانه‌های چاپی و دیجیتال را به کاربر نمی‌دهد.