جداسازی وزیکول های ترشحی غشاء خارجی باکتری اشرشیاکلی با استفاده از فیلتراسیون با جریان مماسی

وزیکول های غشاء خارجی باکتری ها نقش مهمی در فیزیولوژی، بیماری زایی و تعامل بین میزبان و عامل بیماریزا دارند. این وزیکول ها به باکتری اجازه می دهند تا آنزیم ها و محتویات خود را به شکل محافظت شده منتقل کنند و در زنده مانی باکتری نقش دارند. از آنجایی که آن ها به عنوان نماینده باکتری محسوب می شوند، مطالعه آن ها به شناخت بیشتر باکتری ها و تعامل آن ها با محیط کمک می کند. از این رو روش های جداسازی این وزیکول ها اهمیت ویژه ای دارد. لذا هدف از این پژوهش، معرفی روشی نوین برای جداسازی وزیکول های غشاء خارجی باکتری اشرشیاکلی است.
در پژوهش حاضر، باکتری اشرشیاکلی انتروتوکسیژنیک در شرایط استاندارد کشت داده شد. سپس مایع رویی کشت جدا گردید و از فیلتراسیون با جریان مماسی برای تغلیظ وزیکول ها و سانتریفیوژ دور بالا برای رسوب دهی آن ها استفاده شد. وزیکول های جدا شده توسط میکروسکوپ الکترونی عبوری تایید و وزن مولکولی و میزان غلظت پروتئینی مشخص گردید.
ریخت شناسی وزیکول ها توسط میکروسکوپ الکترونی تایید و اندازه آن ها بین 50 تا 100 نانومتر تعیین شد. الگوی الکتروفورتیک نشان دهنده باندهای قوی و ضعیف در ناحیه بین 41-22 کیلودالتون بوده و غلظت پروتئین وزیکول های تخلیص شده 542 میکروگرم مشخص گردید.
نتایج بدست آمده نشان می دهد که در نتیجه استفاده از روش ارائه شده در این مطالعه علاوه بر ارائه محصولی همسان، از بعد اقتصادی و زمانی نسبت به روش های رایج مزایای مثبتی دارد و می تواند زمینه ساز جداسازی این وزیکول ها در سطح صنعتی نیز باشد.