بیان ژن blf1، Burkholderia pseudomallei در باکتری اشرشیاکلی و بررسی تیترآنتی بادی در موش

باکتریB. pseudomallei عامل بیماری میلوئیدوزیس در انسان است و از راه خوراکی، استنشاقی و یا از طریق خراش پوستی به بدن بیماران منتقل می شود. این عامل در طبقه بندی عوامل بیولوژیک در گروه B قرار گرفته است. BLF1 به طور اختصاصی دآمیناسیون Gln339 از eIF4A را انجام می دهد. در این مطالعه، بیان ژن blf1 باکتری B. pseudomallei در E. coli و تولید آنتی بادی در موش بررسی گردید.
در این مطالعه تجربی، بیان ژن blf1 باکتری B. pseudomallei در E. coli صورت گرفت. ژن صناعی در پلاسمید pUC57 از شرکت ندای فن خریداری شد. پلاسمید pUC57 حاوی ژن blf1 با جایگاه های آنزیمی BamHI و SalI در وکتور بیانی pET28a(+) زیرهمسانه سازی شد و به باکتری E. coli سویه BL21(DE3)، تراریخت (ترانسفورم) گردید. بیان ژن blf1 تحت القایIPTG انجام گرفت.
در این مطالعه، ژن blf1 کلون شده در وکتور بیانی pET28a(+) به وسیله PCR و آنالیز آنزیمی تایید شد. همچنین پروتئین نوترکیب تولیدشده به وسیله SDS-PAGE و لکه گذاری وسترن تایید گردید. سپس آنتی بادی تولیدشده از سرم موش، جداسازی و به وسیله تست ELISA مورد تایید قرار گرفت.
با توجه به اینکه پروتئینBLF1 توانایی توقف پروتئین سازی را دارد و آنتی بادی تولیدشده به وسیله تست ELISA مورد تایید قرار گرفته است، از پروتئین نوترکیب BLF1 می توان برای درمان سرطان استفاده و به عنوان کاندیدای واکسن، علیه باکتری B. pseudomallei مطرح نمود.