مقایسه بیان ژن اگریکان در کندروژنز سلول های بنیادی مشتق از چربی در دو سیستم کشت Pellet و Micromass

امروزه سلول های بنیادی مشتق از چربی (ADSC) به دلیل خصوصیات منحصر به فرد مانند راحتی و عدم استفاده از روش های تهاجمی حین استخراج به طور گسترده در مهندسی بافت استفاده می شوند. به منظور افزایش تعاملات بین سلولی مشابه با تراکم های پیش غضروفی جنینی، استفاده از سیستم های کشت سه بعدی همچون Pellet و Micromass ضروری می باشد. اگریکان یکی از مهمترین اجزای ماتریکس خارج سلولی است، بنابراین در مطالعه حاضر بیان اگریکان در طی روند کندروژنز ADSC های انسانی در دو سیستم کشت Pellet و Micromass بررسی شد.
این مطالعه تجربی در گروه آناتومی دانشکده پزشکی دانشگاه علوم پزشکی اصفهان از فروردین 1392 تا بهمن ماه 1393 انجام شد. بافت چربی شکمی از سه بیمار در طی جراحی لیپوساکشن جدا شد. سلول های بنیادی با روش های مکانیکی و آنزیمی استخراج و در کشت تک لایه کشت داده شدند. سپس به منظور القای روند کندروژنز، تعداد 105×5 سلول های پاساژ سوم (P3) به سیستم های کشت Pellet و Micromass حاوی مدیوم کندروژنیک در گروه های آزمایش 7 و 14 روز منتقل شدند. ارزیابی بیان ژن اگریکان توسط تکنیک Real-time PCR انجام شد.
بررسی نتایج Real-time PCR نشان داد که بیان اگریکان در Micromass روز 14 در مقایسه با Pellet روزهای 14 و 7 افزایش معناداری دارد (P=0/008). همچنین بیان اگریکان در Micromass روز هفتم در مقایسه با Pellet روز هفتم نیز افزایش معناداری نشان داد (0/03=P).
با توجه به بیان بالای ژن اگریکان در سیستم کشت Micromass نسبت به کشت Pellet شاید بتوان نتیجه گرفت که کشت Micromassدر مقایسه با کشت Pellet کارایی بیشتری در بیان ژن اگریکان در کندروژنز سلول های بنیادی مشتق از چربی داشته است.