تولید آنتی بادی منوکلونال بر ضد نوکلئوروتئین نوترکیب ویروس آنفلوانزای رندګان، سروتیپ H9N2

ویروس های آنفلوانزای پرندگان شامل تحت تیپ H9N2سبب ضررهای اقتصادی قابل ملاحظه ای به صنعت طیور می شوند. تشخیص سریع و دقیق عفونت آنفلوانزای پرندگان در برنامه های ریشه کنی و کنترل این بیماری بسیار مهم می باشد.
هدف ازاین مطالعه تواید آنتی بادی های منوکلونال اختصاصی نوکلئوپروتئین ویروس آنفلوانزای پرندگان تحت تیپ H9N2 برای بهبود و بیشرفت روش های تشخیصی بود.
پروتئین نوترکیب NP در باکتری E.coli بیان گردید و با استفاده از ستون کروماتوگرافی رزین آمیلوز خالص سازی و به عنوان یک آنتی ژن برای ایمن سازی به موش تزریق شد. فیوژن سلول های طحال با سلول های میلوما انجام شد. در مرحله بعد مایع رویی کشت سلولی کلون های هیبریدوما اولیه به وسیله الایزای غیر مستقیم غربالگری شدند. بعد از سه بار کلونینگ واکنش آنتی بادی های منوکلونال با آنتی ژن های طبیعی و نوترکیب به وسیله وسترن بلات تایید شد.
شش آنتی بادی منوکلونال اتصال اختصاصی به نوکلئوپروتئین نوترکیب و طبیعی در ویروس آنفلوانزای برندگان تحت تیپ H9N2 در وسترن بلات٬ الیزا و ایمونوفلورسانس را نشان دادند. واکنش متقاطع با ویروس های غیر مرتبط از لحاظ ژنتیکی از جمله ویروس نیوکاسل (خانواده پارامیکسوویریده) تشخیص داده نشد.
نتیجه گیری نهایی: بر اساس نتایج آنتی بادی های منوکلونال تولید شده در این مطالعه می توانند برای طراحی آزمایشات تشخیصی سریع برای شناسایی ویروس آنفلوانزای پرندگان استفاده شوند