Clonage du gène iota-toxine du Clostridium perfringens chez

Iota-toxine est produite par le Clostridium perfringens de type E. Cette toxine provoque une entérotoxémie associée aux antibiotiques chez les agneaux et les veaux. Liota-toxine est une toxine binaire qui a deux composants dont Ia (le composant enzymatique) et Ib (le composant de liaison). Ib se lie au récepteur de surface des cellules cibles et translocation Ia dans le cytosol des cellules. Le but de cette recherche était le clonage de l'épitope toxigénique du gène iota a dans la souche d’E. coli Top10. Dans ce travail de recherche, la méthode phénol-chloroforme a été utilisée pour lextraction de lADN entier. L'épitope toxigénique de iota est un gène amplifié par PCR. Le produit de PCR a été ligaturé dans le clonage du vecteur pTZ57R / T et a été ensuite cloné dans E. colistrain Top10 selon la méthode de clonage TA,. L’analyse PCR des colonies a été utilisée pour cribler des colonies bactériennes qui ont été transformées avec des plasmides recombinants. La présence dun fragment de 446 pb sur legel dagarose a montré que l'épitope toxigénique de iota, un gène de C. perfringens, a été cloné dans la souche d’E. coli Top10.