جداسازی، کشت و تعیین هویت سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی با استفاده از روش اکسپلنت_آنزیمی

در این مطالعه، ترکیبی از روش آنزیمی و اکسپلنت را برای جداسازی و کشت سلول های بنیادی چربی مورد استفاده قرار گرفت.
بافت چربی ناحیه ی شکم از رت های نر نژاد ویستار جدا شد. بافت ها به قطعات کوچک (mm2≈( تقسیم شدند، سپس آنزیم Trypsin –EDTA با غلظت 25/0 درصد به بافت ها افزوده شد و به‫دنبال آن به‫مدت 30 دقیقه در دمای 37 درجه سانتی گراد در انکوباتور شیکردار قرار داده شدند. سپس بافت تیمار شده با آنزیم سانتریفیوژ شده و قطعات شناور کشت داده شدند. آنالیزهای آماری مربوط به تعداد سلول ها با استفاده از نرم افزار GraphPad Prismv6 مورد بررسی قرار گرفت.
نتایج نشان داد که جمعیت سلول های بنیادی چربی جداسازی شده توسط این روش ترکیبی، تحت تاثیر تنش کمتری قرار خواهند گرفت و جمعیت سلولی همگن و مشابهی را از لحاظ ظاهری و ریخت شناسی نشان خواهند داد و نیز آنالیز فلوسایتومتری مارکر های سطحی نشان داد که این سلول ها برای CD73، CD105، CD44 و CD90 مثبت و برای CD34، CD45 و CD11b منفی بودند
در این مطالعه نشان داده شد که سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی رت می تواند با روش جدید اکسپلنت_آنزیمی جداسازی شوند که این روش، یک روش کشت سلولی با قابلیت تکرارپذیری بالا و بسیار به صرفه از لحاظ اقتصادی برای کاربردهای کلینیکی می باشد.