تاثیر افزایش بیان miR-579 بر ژن های BAX و CDKN1A در رده سلولی گلیوبلاستوما

  گلیوبلاستوما مولتی فرم یکی از انواع سرطان های مغزی است که پاسخ مناسبی به درمان نشان نمی دهد. پیش آگهی بد این بیماری به دلیل وجود حالت مقاومت به پرتو و شیمی درمانی است. هدف مطالعه حاضر تولید ویروس لنتی حامل پیش ساز miR-579 و بررسی تاثیر افزایش بیان miR-579 بر بیان ژن های BAX و CDKN1A در رده سلولی گلیوبلاستوما بود. در مطالعه تجربی حاضر برای تولید ویروس لنتی نوترکیب قطعه ژنی حاوی توالی پیش ساز miR-579 در پلاسمید pCDH همسانه سازی شد. سازه نوترکیب به همراه پلاسمیدهای psPAX و pMD2 به سلول های HEK293T انتقال داده شد. ذرات ویروسی با روش اولتراسانتریفیوژ تغلیظ شدند. تیتر ویروسی با روش فلوسایتومتری محاسبه شد. ذرات ویروسی تولیدشده به دومان سلولی A-172 انتقال داده شدند. در نهایت با بهره گیری از روش PCR در زمان واقعی تغییرات، سطوح بیانی miR-579 و ژن های BAX و CDKN1A بررسی شدند. حضور پیش ساز ژن miR-579 در پلاسمید با کمک روش های کلونی PCR و توالی یابی مورد تایید قرار گرفت. بررسی ها نشان دادند که سطح بیان miR-579 در سلول های آلوده شده با ویروس نوترکیب در مقایسه با گروه کنترل افزایش هفت برابری یافت. افزایش بیان miR-579 منجر به افزایش بیان ژن BAX تا سه برابر شد اما در مقابل تغییر معنی داری در بیان ژن CDKN1A مشاهده نشد. افزایش بیان miR-579 در رده سلولی A-172 می تواند بیان ژن BAX را افزایش دهد؛ اما در بیان ژن CDKN1A تغییر معنی داری ایجاد نمی کند.