القای آپوپتوز در سلول های گلیوما به وسیله مهار ژن HIF-1α

 فاکتور رونویسی HIF-1، یک عامل تعیین کننده کلیدی در تنظیم ژن وابسته به اکسیژن است که نقش آن برای بقا و پیشرفت تومورهای سرطانی به اثبات رسیده است. بررسی تاثیر سرکوب HIF-1α برای بررسی فرآیندهای وابسته HIF-1 و تداخل با حوادث پاتوفیزیولوژیک ناشی از هیپوکسی اهمیت دارد. هدف پژوهش حاضر القای آپوپتوز در سلول های گلیوما به وسیله مهار ژن HIF-1α بود. در این پژوهش تجربی، siRNA اختصاصی علیه ژن HIF1α از سرورهای OligoWalk وMit (siRNA.wi.mit.edu) و بخش طراحی آنلاین شرکت های Invivogene و Qiagene طراحی شد و کارآیی خاموش سازی آن در رده سلولی گلیومای U87 به وسیله تکنیک ریل تایم پی سی آر به صورت کمی مورد بررسی قرار گرفت. برای پی بردن به تاثیر کاهش بیان در روند چرخه سلولی و آپوپتوز، رنگ آمیزی با PI و انکسین- PI انجام و با تکنیک فلوسایتومتری، تعداد سلول ها در هر فاز و میزان مرگ ومیر سلولی با کنترل مقایسه شد. siRNA اختصاصی طراحی شده برای ژن HIF1α قادر به کاهش بیان ژن به میزان 40% بود. تیمار سلول های U87 پس از 24 ساعت سبب افزایش 6% سلول ها و پس از 48 ساعت، سبب 12% افزایش سلول ها در مرحله sub G1 شد. در تایید تغییرات چرخه سلولی، تیمار 48ساعته، سبب القای آپوپتوز در 58% سلول ها شد که با توجه به میزان 1/5درصدی آپوپتوز در سلول های کنترل، این مقدار مرگ سلولی بسیار چشمگیر بود و توانایی siRNA طراحی شده را در القای آپوپتوز نشان داد. القای آپوپتوز با siRNA اختصاصی طراحی شده علیه ژن HIF1α بر کاهش بیان ژن HIF-1α، روند رشد سلول ها و افزایش آپوپتوز تاثیر قابل ملاحظه ای دارد.