اثر اوره، گوانیدین هیدروکلراید و حلال های آلی بر فعالیت سینتیکی آنزیم پروتئینازK-

پروتئیناز K یک اندوپپتیداز خارج سلولی است که توسط قارچ تریتیراچیوم آلبوم لیمبر (Tritirachum album Limber) ترشح می شود و متعلق به رده سرین اندوپپتیدازها است. این آنزیم در مطالعات مربوط به پروتئین ها کاربرد دارد. هدف مطالعه حاضر بررسی اثر اوره، گوانیدین هیدروکلراید و سه حلال آلی متانول، اتانول و ایزوپروپانول بر فعالیت سینتیکی آنزیم پروتئیناز K بود. در مطالعه تجربی حاضر مطالعات سینتیکی با دستگاه اسپکتروفتومتر UV-Vis، در دمای °C40، pH برابر 7/4 و غلظت های مختلف سوبسترا، اوره و گوانیدین هیدروکلراید انجام شد. اوره در غلظت های یک و 2 مولار موجب کاهش Vmax و Km آنزیم شد، ولی در غلظت های بالاتر مانند 3 و 4مولار فعالیت آنزیم را افزایش داد. گوانیدین هیدروکلراید بر فعالیت آنزیم اثر مهارکنندگی داشت، به طوری که در غلظت های یک، 2 و 3 مولار موجب کاهش در Vmax و Kmشد و به عنوان مهارکننده نارقابتی برای آنزیم عمل کرد. حلال های آلی متانول، اتانول و ایزوپروپانول در غلظت های پایین اثر فعال کنندگی و در غلظت های بالا اثر مهاری بر فعالیت سینتیکی آنزیم پروتئیناز K داشتند. اوره در غلظت های پایین اثر مهاری و از غلظت 2مولار به بالا اثر فعال کنندگی بر فعالیت آنزیم دارد، ولی گوانیدین هیدروکلراید در تمامی غلظت ها اثر مهاری نشان می دهد و می توان از آن به عنوان یک مهارکننده آنزیم نام برد. اثر حلال های آلی متانول، اتانول و ایزوپروپانول روی فعالیت آنزیم پروتئیناز K به درصد حجمی- حجمی آنها بستگی دارد؛ آنها در درصد های پایین باعث فعال شدن آنزیم می شوند، ولی در درصدهای بالا اثر مهاری دارند، به طوری که متانول زیر 30%، اتانول و ایزوپروپانول کمتر از 50% آنزیم را فعال می کنند.