بررسی مولکولی کاندیدا آلبیکنس جدا شده از عفونت های پریودنتال و تاثیر عصاره جلبک سارگاسوم بر بیان ژن بیو فیلم ALS با روش Real-Time-PCR

کاندیدا، پاتوژن فرصت طلبی است که در افراد با سیستم نقص ایمنی و تضعیف شده ایجاد بیماری می کند. بیماری های پریودنتال، حالت التهابی و مخرب کمپلکس دندانی- لثه ای است که رشد بیوفیلم ناشی از گونه های کاندیدا گلابراتا، پاراپسیلوزیس و تروپیکالیس نسبت به کاندیدا آلبیکنس در آن کمتر است. جلبک قهوه ای سارگاسوم به علت داشتن منشاء طبیعی نسبت به داروهای شیمیایی سازگاری بیشتری باانسان دارد و عوارض جانبی کمتری ایجاد می کند. هدف مطالعه حاضر بررسی مولکولی گونه های کاندیدا جدا شده از عفونت های پریودنتال و تاثیر عصاره جلبک قهوه ای Sargassum glaucescens بر بیان ژن تشکیل دهنده بیوفیلم با روش Real-Time-PCR بود. نمونه های دهانی عفونت پریودنتال از بیماران مراجعه کننده جمع آوری شد. جهت ایزولاسیون گونه های کاندیدا از نمونه ها روی محیط سابورو دکستروز آگار حاوی کلرامفنیکل (SDAc) کشت شد. از کلنی های رشد یافته با روش کیت و پرل شیشه ای استخراجDNA  انجام شد. کلنی های رشد یافته با پرایمرهای اختصاصی به روش PCR-RFLP شناسایی گردید. به منظور شناسایی بیان ژن های als در ایزوله های کاندیدا استخراج RNA با روش فنل- کلروفرم و پرل شیشه ای و برای ارزیابی تاثیر عصاره سارگاسوم گلسیسنس از دستورالعمل CLSI-M27-A2 استفاده شد. نتایج حاصل نشان داد که میزان بیان ژن als در عفونت پریودنتال در سنین مختلف نسبت به سایر ژن ها بیشتر است. نقش دیگر  alsدر تشکیل بیوفیلم کاندیدا آلبیکنس است. حداقل غلظت مهارکنندگی رشد قارچ توسط عصاره جلبک 256 میکروگرم بر میلی لیتر بود. سارگاسوم گلوسنس حدود 62% بیان ژن als را در نمونه های مورد بررسی کاهش داد. سارگاسوم گلوسنس دارای ویژگی های خاص فارماکولوژیک و اثرات ضد قارچی و ضد میکروبی قابل توجهی است. بررسی نتایج با Real Time PCR نشان داد که بیان ژن als در ایزوله های تحت مطالعه تیمار شده با عصاره جلبک سارگاسوم نسبت به ایزوله های تیمار نشده پایین تر بوده و نشان دهنده نقش مثبت عصاره در کاهش بیان ژن مولد بیوفیلم در ایزوله ها بود.