Optimization of Cloning Conditions for high-level Production of Recombinant Mouse Interleukin-2 in Escherichia coli
Message:
Abstract:
Backgrounds and objectives

Interleukin 2 (IL-2) secreted by activated CD4+ T cells  has been known as a major mediator in both  adaptive and native immune system  due to a board range of effects on  different cells in the immunity system (1-6).

Methods

cDNA synthesis was performed using gene- specific primers designed by Gene Runner software after RNA extraction of mouse splenocytes. PCR product purification   carried out after IL-2 coding sequence amplification and was ligated into the pET-21b (+) vector and transformed into competent TOP10 E.Coli. Expression and purification of recombinant mouse IL-2 were done using IPTG inducer and metal affinity chromatography respectively.

Results

DNA sequencing confirmed the accuracy of the insertion process. 23 KDa exogenous protein was observed on the SDS-PAGE. Specificity and   concentration of produced mouse recombinant IL-2 protein were confirmed by western blotting and BCA methods.

Conclusion

Recombinant IL-2 has produced in BL21 (DE3) pET-21b (+) expression system at 24°C in the soluble form.

Article Type:
Research/Original Article
Language:
English
Published:
Research in Molecular Medicine, Volume:7 Issue: 1, 2019
Pages:
16 - 25
magiran.com/p2007403  
برخی از خدمات از جمله دانلود متن مقالات تنها به مشترکان مگیران ارایه می‌گردد. شما می‌توانید به یکی از روش‌های زیر مشترک شوید:
اشتراک شخصی
در سایت عضو شوید و هزینه اشتراک یک‌ساله سایت به مبلغ 400,000ريال را پرداخت کنید. همزمان با برقراری دوره اشتراک بسته دانلود 100 مطلب نیز برای شما فعال خواهد شد!
پرداخت با کارتهای اعتباری بین المللی از طریق PayPal امکانپذیر است.
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی همه کاربران به متن مطالب خریداری نمایند!
توجه!
  • دسترسی به متن مقالات این پایگاه در قالب ارایه خدمات کتابخانه دیجیتال و با دریافت حق عضویت صورت می‌گیرد و مگیران بهایی برای هر مقاله تعیین نکرده و وجهی بابت آن دریافت نمی‌کند.
  • حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران می‌شود.
  • پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانه‌های چاپی و دیجیتال را به کاربر نمی‌دهد.