بررسی اثر مایع آمنیوتیک انسانی بر بقا و تکثیر رده های سلولی میلومای انسانی RPMI8226 و U266 در مقایسه با سرم جنین گاوی

بیماری مالتیپل میلوما یک بدخیمی مربوط به پلاسماسل می باشد. از آنجا که مطالعه ی مکانیسم های بیماری زایی و مسیرهای پیام رسان دخیل در سلول های عامل ایجاد بیماری در محیط آزمایشگاهی و نزدیک به محیط فیزیولوژیک بدن مهم می باشد؛ بنابراین بهترین محیط برای مطالعه ی سلول ها در محیط آزمایشگاهی، محیطی با بیشترین شباهت به محیط فیزیولوژیک بدن می باشد. این در حالی است که استفاده از سرم جنین گاوی (FBS) به عنوان مکمل رشد سلول ها در فرآیند کشت سلولی بسیار رایج می باشد؛ بنابراین هدف این مطالعه تاثیر مایع آمنیوتیک در تکثیر (Ki-67 و Cyclin-D) و بقاء (Bax و Bcl2) دو رده میلومایی RPMI8226 و U266 در مقایسه با سرم جنین گاوی می باشد. مایع آمنیوتیک انسانی از 6 خانم باردار در حین عمل سزارین و بصورت استریل جمع آوری شد. پس از کشت رده های سلولی میلوما (RPMI8226 و U266)، تیمار رده های سلولی در چهار گروه با نسبت های متفاوت مایع آمنیوتیک انجام شد. 48 و 96 ساعت پس از تیمار، شمارش سلولی و بررسی حیات سلول ها با استفاده تریپان بلو و لام نئوبار انجام گرفت. هم چنین تست MTT جهت بررسی زنده مانی سلول های میلومایی تیمار شده انجام گرفت و در نهایت میزان بیان ژن های Ki67، Cyclin-D1، Bax و Bcl-2 توسط تکنیک Real time PCR و به روش SYBR Green مورد ارزیابی واقع شد. بررسی میزان بیان ژن های دخیل در فرآیند تکثیر و آپوپتوز سلولی نشان داد که در گروه های مورد مطالعه تحت تیمار با مایع آمنیوتیک، افزایش معنادار بیان ژن های Ki-67، Cyclin-D1 و همچنین افزایش بیان ژن آنتی آپوپتوتیک bcl-2 و در مقابل کاهش معنادار بیان ژن مسئول آپوپتوز، Bax مشاهده شد. داده های ما نشان می دهد مایع آمنیوتیک به عنوان یک منبع مغذی می تواند رشد و تکثیر سلول ها را تا 96 ساعت به صورت معناداری نسبت به سرم جنین گاوی افزایش دهد، هرچند که میزان تکثیر و بقای سلولی در 48 ساعت نسبت به 96 ساعت پس از کشت بیشتر می باشد. بنا بر یافته های این مطالعه می توان از مایع آمنیوتیک به عنوان حامی رشد به عنوان جایگزینی برای سرم جنین گاوی تا 96 ساعت استفاده نمود. در این مطالعه تاثیر این مایع بر دو رده سلولی میلومایی ارزیابی گردید که به نظر می رسد بهتر است برای نتیجه گیری جامع تر در این مورد بر سلول های دیگر نیز مورد آزمون واقع شود.