عوامل ضد باکتریایی؛ بیوفیلم؛ لاکتوباسیلوس روتری؛ پنی باسیلوس لاروا؛ فاکتورهای بیماری زایی

پیشینه:

پنی باسیلوس لاروا عامل ایجاد کننده بیماری لوک آمریکایی (AFB)، کشنده ترین بیماری در لارو زنبور عسل (آپیس ملیفرا)، می باشد.

هدف از انجام تحقیق حاضر مطالعه بررسی اثر ضد میکروبی مایع رویی عاری از سلول (CFS) پروبیوتیک ها بر روی تشکیل بیوفیلم یک جدایه ایرانی بود.

یک سویه بومی پنی باسیلوس لاروا بر اساس تعیین توالی 16S rRNA شناسایی شد. اثر ضد میکروبی تعدادی از پروبیوتیک ها با روش قطره پلیت، حداقل غلظت مهار کننده (MIC) و حداقل غلظت کشنده باکتری (MBC) و آزمون زمان کشندگی ارزیابی شد. توانایی تشکیل بیوفیلم پنی باسیلوس لاروا و اثر مهاری ایجاد بیوفیلم توسط CFS با روش میکروتیتر پلیت و میکروسکوپ الکترونی نگاره (SEM) مورد مطالعه قرار گرفت. ماهیت متابولیت های ثانویه در CFS با آزمون MODA بررسی شد.

نتایج توالی یابی 16S rRNA پنی باسیلوس لاروا KB10 (شماره دسترسی بانک ژن MH000685.1) با پایگاه داده، نشان دهنده شباهت بیش از 97% با     پنی باسیلوس لاروا بود. بیشترین اثر ضد باکتری در CFC لاکتوباسیلوس روتری ATCC23272با قطر هاله عدم رشد (ZOI) 2/3 ± 75/12 میلی متر در رقت µL/ml 1000 برای MIC و MBC مشاهده شد. آزمون زمان کشندگی نشان داد که CFS قادر به از بین بردن     CFU/ml 108 × 5/1 پنی باسیلوس لاروا KB10 در مدت زمان دو ساعت مواجهه بود. نتایج میکروتیتر پلیت و SEM نشان داد که CFS (در غلظت زیر MIC) قادر به مهار کردن تشکیل بیوفیلم توسط پنی باسیلوس لاروا بود. نتایج حاصل از آزمون MODA نشان داد که فعالیت ضد میکروبی مربوط به تولید اسیدهای آلی موجود در آن می باشد. نتیجه گیری: مایع رویی عاری از سلول لاکتوباسیلوس روتری ATCC23272، به دلیل ماهیت اسیدی، دارای اثرات مهار کننده بر روی رشد و تشکیل بیوفیلم باسیلوس لاروا KB10 بود. نتایج به دست آمده می تواند جهت جایگزین کردن آنتی بیوتیک در کنترل و درمان بیماری لوک آمریکایی مورد استفاده قرار گیرد.