Expression of a New Recombinant Collagenase Protein of Lucilia Sericata in SF9 Insect Cell as a Potential for Wound Healing
Message:
Abstract:
Background
Today, the use of maggot therapy has become widespread due to the increase in chronic ulcers in the world. The recombinant production of secreted enzymes from these larvae is a novel non-invasive method for the treatment of chronic ulcers. Lucilia sericata (L. sericata) collagenase (MMP-1) has been expressed in insect cells. Collagenase is an enzyme that is widely used in clinical therapy and industry. It has been indicated that collagenase is expressed and secreted in salivary glands of L. sericata while using for maggot debridement therapy.
Objectives
In the present study we decided to produce the recombinant form of collagenase enzyme in Spodoptera frugiperda (SF9) insect cells using the baculovirus expression system (Bac-to-Bac).
Materials and Methods
cloned the coding sequences (residues 494-1705) of L. sericata collagenase into the pFastBacHTA as donor plasmid. After transposition in the bacmid of DH10Bac host, the bacmid was transfected into the Sf9 cell line, then the expressed recombinant collagenase (MMP-1) was purified using the Ni-NTA agarose.
Results
The recombinant protein was verified by Western blotting. Furthermore, the biological activity of purified protein was measured in the presence of its specific substrate and its inhibitor, which was 67 IU.mL-1 based on our results, it was revealed that the characterized gene in our previous study codes L. sericata collagenesa enzyme.
Conclusion
Considering to the broad applications of collagenase in medical sciences, for the first time, we cloned the L. sericata collagenase (MMP-1) gene into the insect cell line to establish a method for the expression and purification of L. sericata collagenase (MMP-1). The result help for preparing and designing a safe and versatile recombinant drug in future.
Article Type:
Research/Original Article
Language:
English
Published:
Iranian Journal of Biotechnology, Volume:17 Issue: 4, 2019
Pages:
16 - 24
magiran.com/p2117534  
برخی از خدمات از جمله دانلود متن مقالات تنها به مشترکان مگیران ارایه می‌گردد. شما می‌توانید به یکی از روش‌های زیر مشترک شوید:
اشتراک شخصی
در سایت عضو شوید و هزینه اشتراک یک‌ساله سایت به مبلغ 400,000ريال را پرداخت کنید. همزمان با برقراری دوره اشتراک بسته دانلود 100 مطلب نیز برای شما فعال خواهد شد!
پرداخت با کارتهای اعتباری بین المللی از طریق PayPal امکانپذیر است.
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی همه کاربران به متن مطالب خریداری نمایند!
توجه!
  • دسترسی به متن مقالات این پایگاه در قالب ارایه خدمات کتابخانه دیجیتال و با دریافت حق عضویت صورت می‌گیرد و مگیران بهایی برای هر مقاله تعیین نکرده و وجهی بابت آن دریافت نمی‌کند.
  • حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران می‌شود.
  • پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانه‌های چاپی و دیجیتال را به کاربر نمی‌دهد.