بررسی silico in و بیان پروتئین فیوز شده LTP-EAAAK-Osmotin
عوامل قارچی سبب بوجود آمدن مشکلات متعددی در صنعت کشاورزی میشوند. گیاهان از مکانیسمهای دفاعی مختلفی برای مقاومت علیه عوامل بیماریزای قارچی استفاده میکنند. ساختن سد فیزیکی، تولید ترکیبات شیمیایی و تولید پروتئینهای مرتبط با بیماریزایی مانند LTP و اسموتین که میتوانند مانع رشد قارچ در غلظتهای بسیار کمی شوند، مثالهایی از این مکانیسم ها هستند. در این مطالعه، ژنهای اسموتین و LTP بوسیله لینکر EAAAK برای ایجاد یک سازه واحد به یکدیگر فیوز شدند. مطالعات silico in برای پیشبینی و تحلیل پروتئین فیوز شده LTP-EAAAK-Osmotin بکار گرفته شد. ساختار دوم و سوم و شکل گیری mRNA پروتئین فیوز شده با استفاده از ابزارهای بیوانفورماتیکی پیشبینی شدند. سازه طراحی شده بصورت شیمایی سنتز و در وکتور کلونینگ pUC57 کلون و برای بیان پروتئین فیوز شده، ژن در وکتور بیانی (+) 21-pET با توالی هگزاهیستیدین کلون شد. برای بیان پروکاریوتی این ژن از باکتری (DE3 (BL21 coli. E استفاده گردید و شرایط بیانی مختلفی برای بیان پروتئین فیوز شده مورد بررسی قرار گرفت. پروتئین فیوز شده در دمای C ° 28 با mM 1 IPTG بعد از سه ساعت انکوباسیون بیان شد و سپس بیان پروتئین با روش وسترن بلات مورد تایید قرار گرفت. مطالعه فعالیت ضدقارچی پروتئین فیوز شده با استفاده از آزمون نشر شعاعی بررسی شد. این پروتئین توانایی این را داشت که در شرایط vivo in فعالیت ضد قارچی بر علیه قارچهای بیماریزای گیاهی مورد بررسی نشان دهد.
- حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران میشود.
- پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانههای چاپی و دیجیتال را به کاربر نمیدهد.