Purification of recombinant human growth hormone produced in soluble form in Escherichia coli in lab-scale
Message:
Abstract:
Background & Objective

Human growth hormone (hGH) or somatotropin is a single chain polypeptid which consisting of 191 amino acid residues and molecular weight of 22kDa. Overexpression of hGH in Cytoplasm often results in forming inclusion bodies (IBs). Purification process of hGH from IBs needs refolding process in order to obtain native protein that is complicated and often does not have good efficiency. Therefore, the high expression of soluble form is always considered.

Material & method

In this study, recombinant E. coli-pET32a(+)-Trx-His6-hGH was used. In order to obtain high level production of soluble hGH in cytoplasm was used from Trx tag and for purification process of hGH was used from His tag. The bacteria was grown in LB and TB culture media at 25 ⁰C. The purification process carried out based on affinity chromatography using Ni-NTA resin.

Results

The SDS-PAGE analysis showed 55% hGH expression that 33.7% expressed as soluble and 18.8% expressed as IBs. The amount of hGH fusion protein purified through Ni-NTA column was 22. 4 mg per gram of wet cells.

Conclusion

The results of this study indicate that hGH-Trx fusion protein was properly expressed. The purity of hGH fusion protein purified by histidine-tagged protein purification method was determined 91% with the total yield of 38%.

Article Type:
Research/Original Article
Language:
Persian
Published:
Journal of Microbial World, Volume:12 Issue: 4, 2020
Pages:
343 - 354
magiran.com/p2136809  
برخی از خدمات از جمله دانلود متن مقالات تنها به مشترکان مگیران ارایه می‌گردد. شما می‌توانید به یکی از روش‌های زیر مشترک شوید:
اشتراک شخصی
در سایت عضو شوید و هزینه اشتراک یک‌ساله سایت به مبلغ 400,000ريال را پرداخت کنید. همزمان با برقراری دوره اشتراک بسته دانلود 100 مطلب نیز برای شما فعال خواهد شد!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی همه کاربران به متن مطالب خریداری نمایند!
توجه!
  • دسترسی به متن مقالات این پایگاه در قالب ارایه خدمات کتابخانه دیجیتال و با دریافت حق عضویت صورت می‌گیرد و مگیران بهایی برای هر مقاله تعیین نکرده و وجهی بابت آن دریافت نمی‌کند.
  • حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران می‌شود.
  • پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانه‌های چاپی و دیجیتال را به کاربر نمی‌دهد.