شناسایی گونه های مایکوباکتری های غیر عوامل سلی با استفاده از آنالیز PCR-RFLP در مایعات حاصل از شستشوی نای در گاوها و بوفالوهای دچار دیسترس تنفسی

سل گاوی (bTB) یک بیماری مزمن در گاوها و با اهمیت اقتصادی بالا در دامپروری است که توسط مایکوباکتریوم بوویس ایجاد می شود و دارای قابلیت انتقال به انسان به عنوان بیماری مشترک بین انسان و دام، می باشد. تعدادی مایکوباکتری های غیر عوامل سلی (NTM) هستند که بیماری مشابه با bTB ایجاد می کنند و سبب اختلال در تشخیص bTB می شوند. مایکوباکتری های غیر عوامل سلی ذاتا ساپروفیت هستند، اما برخی از آن ها ممکن است که سبب عفونت های ریوی، ورم پستان، جراحات در مجاری تنفسی و گره های لنفاوی گاوها شوند؛ از اینرو در سراسر جهان شناخته شده بوده و سبب اختلال در تشخیص bTB می شوند. 

 هدف از این مطالعه شناسایی گونه های NTM از گاوها و بوفالوهای دچار دیسترس تنفسی با استفاده از روش های بیوشیمیایی و واکنش زنجیره ای پلیمراز-تحلیل چند شکلی طولی قطعات برش یافته (PCR-RFLP) (PRA) بود. 

 در مجموع 50 نمونه حاصل از شستشوی نایی 41 راس گاو و 9 راس بوفالوی دچار دیسترس تنفسی، جمع آوری شد. نمونه ها پس از آلودگی زدایی مناسب با NaOH 4% به محیط میدل بروک 7H10 تلقیح شدند. جدایه های به دست آمده با آزمون های بیوشیمیایی شناسایی شدند. DNA های استخراج شده از نمونه ها و جدایه ها با روش PRA که شامل تکثیر ژن hsp65 (bp 439) و تحلیل RFLP محصول تکثیر شده بود، مورد بررسی قرار گرفتند. 

 از 50 نمونه حاصل از شستشوی نای، تنها یک جدایه از مایکوباکتریوم کانساسی (1 عدد) (2%) به دست آمد که با آزمون های بیوشیمیایی و PRA تایید شد. مایکوباکتریوم کانساسی (4 عدد) (8%)، مایکوباکتریوم اینتراسلولار (1 عدد) (2%)، و مایکوباکتریوم واکا (1 عدد) (2%) با روش PRA شناسایی شدند.

این مطالعه به اهمیت NTB در حیوانات تاکید دارد. واکنش زنجیره ای پلیمراز-تحلیل چند شکلی طولی قطعات برش یافته، روشی مطمین تر و سریع تر برای شناسایی NTB نسبت به روش های رایج است.