Design, Expression and Purification of Strongyloides stercoralis IgG4 Immunoreactive Protein (NIE) in Escherichia coli
Message:
Abstract:
Background

Strongyloidiasis is a public health concern in northern regions of Iran, caused by Strongyloides stercoralis. Auto-infection cycle can be resulted in high parasitic load, especially in immunocompromised hosts. Because of low sensitivity of stool culture and stool-based microscopy techniques, detection of antibodies in patient’s sera can be an alternative diagnostic technique for detection of the nematode. In the present study, as the first step of the development of an ELISA kit for the detection of antibodies against the nematode, IgG4 immunoreactive protein (NIE) was expressed in Escherichia coli expression system, purified and verified.

Methods

The NIE gene sequence was retrieved from the GenBank. This sequence was codon-optimized for the expression in E. coli BL21 (DE3). The sequence was inserted into the expression vector pET-30b (+). The recombinant vector was then transferred into competent E. coli BL21 (DE3). Transformed colonies were selected and verified by colony PCR. NIE gene expression was induced with IPTG induction. The protein production was evaluated by SDS-PAGE and verified using Western blotting.

Results

The codon-optimized NIE gene had required parameters for expression in E. coli. NIE protein was proved and verified by SDS-PAGE and Western blotting.

Conclusion

NIE recombinant protein was successfully expressed in E. coli expression system in appropriate amounts. The recombinant protein can be used for developing ELISA kit in diagnosis of S. stercoralis.

Article Type:
Research/Original Article
Language:
English
Published:
Iranian Journal of Parasitology, Volume:15 Issue: 3, 2020
Pages:
341 - 348
magiran.com/p2169418  
برخی از خدمات از جمله دانلود متن مقالات تنها به مشترکان مگیران ارایه می‌گردد. شما می‌توانید به یکی از روش‌های زیر مشترک شوید:
اشتراک شخصی
در سایت عضو شوید و هزینه اشتراک یک‌ساله سایت به مبلغ 400,000ريال را پرداخت کنید. همزمان با برقراری دوره اشتراک بسته دانلود 100 مطلب نیز برای شما فعال خواهد شد!
پرداخت با کارتهای اعتباری بین المللی از طریق PayPal امکانپذیر است.
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی همه کاربران به متن مطالب خریداری نمایند!
توجه!
  • دسترسی به متن مقالات این پایگاه در قالب ارایه خدمات کتابخانه دیجیتال و با دریافت حق عضویت صورت می‌گیرد و مگیران بهایی برای هر مقاله تعیین نکرده و وجهی بابت آن دریافت نمی‌کند.
  • حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران می‌شود.
  • پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانه‌های چاپی و دیجیتال را به کاربر نمی‌دهد.