مطالعه فلور میکروبی روده جوجه های محلی برای یافتن پروبیوتیک های باسیلوس سوبتلیس و باسیلوس کوآگولانس و بررسی تاثیر آن بر بیان ژن های بیماری زای ctxm و luxs در جدایه های بیماری زای اشریشیاکولی

از آنتی بیوتیک ها به طور گسترده ای در سراسر جهان استفاده می شود. بااین حال، به دلیل ظهور مقاومت آنتی بیوتیکی در طیف وسیعی از میکروارگانیسم ها، استفاده از آن ها در سطح جهانی دچار شکست بزرگی شده است. استفاده از پروبیوتیک ها به عنوان درمان مکمل و جایگزین برای آنتی بیوتیک ها مطرح شده اند. هدف از پژوهش حاضر بررسی اثرات پروبیوتیک های جداشده از مرغ های محلی بر بیان ژن های luxS, ctxM در اشریشیاکلی مقاوم به درمان بود.

300 نمونه مدفوعی در فاصله اردیبهشت تا مهرماه سال 1399 از بیماران مراجعه کننده به بیمارستان امام خمینی تهران اخذ شد و با محیط های کشت اختصاصی و آزمایش های بیوشیمیایی نمونه های اشریشیاکلی جداسازی شد و سپس توسط PCR با پرایمرهای اختصاصی وجود ژن های luxS و ctxM مورد شناسایی قرار گرفت. جهت استخراج سویه های بومی باسیلوس کوآگولانس و باسیلوس سوبتلیس محتویات روده تعداد 9 قطعه جوجه محلی که هیچ آنتی بیوتیکی مصرف نکرده بودند کشت، جداسازی و توسط روش های بیوشیمیایی و PCR شناسایی شد. سویه های تجاری باسیلوس سوبتلیس و باسیلوس کوآگولانس برای مقایسه اثرات با باکتری های بومی خریداری شده و در ادامه این سویه ها در کشت هم زمان با سویه های اشریشیاکلی مقاوم به درمان حاوی ژن های ctxm و luxs قرار گرفتند. جهت بررسی تاثیر این پروبیوتیک ها بر بیان ژن ها از ریل تایم PCR استفاده شد.

از 300 نمونه مدفوعی گرفته شده 40 جدایه(5/7 درصد) اشریشیاکلی به دست آمد؛ که 13 نفر از نمونه ها(5/32 درصد) مربوط به بیماران سرپایی و 27 نفر را(5/67 درصد) بیماران بستری تشکیل می دادند. همه ایزوله ها از زنان و مردان با رنج سنی بین 21 تا 62 سال جداشده بودند. 4 سویه اشریشیاکلی جداشده از بیماران حامل ژن های ctxM, luxS, بودند. جداسازی باسیلوس کوآگولانس و باسیلوس سوبتلیس از نمونه ها با آزمایش های بیوشیمیایی و مولکولی تایید شد. سویه تجاری باسیلوس کوآگولانس بیان ژن های، ctxM, luxS را به ترتیب به میزان 3/3 ، 2/7 برابر کاهش و سویه بومی بیان این ژن ها را به ترتیب 6/3 ، 2/2 برابر نسبت به گروه کنترل در باکتری اشریشیاکلی کاهش داد. نتایج آنالیز آماری نشان داد که بین حضور پروبیوتیک های بومی و تجاری موجود درکشت و کاهش بیان ژن های ctxM و luxS ارتباط معنی داری وجود دارد.

مصرف مکمل باسیلوس کوآگولانس و باسیلوس سوبتلیس با کم کردن بیان ژن های مقاومت باعث افزایش تاثیر آنتی بیوتیک ها بر اشریشیاکلی مقاوم به درمان می شوند.