ژنوتایپینگ باکتری گونه های باکتری بروسلا جدا شده از نمونه های بیماران مشکوک به تب مالت با تکنیک PCR-RFLP در تهران 1399-1396

بروسلوز یکی از مهمترین بیماری های زیونوز می باشد. در بسیاری از کشور های جهان از جمله ایران ، از نظر بهداشتی و اقتصادی بسیار حایز اهمیت است.. در این مطالعه ، ژنوتایپینگ گونه های باکتری بروسلا جدا شده از نمونه های بیماران مشکوک به تب مالت به وسیله تکنیک RFLP PCR در تهران مورد بررسی قرار گرفت.

از مجموع 453نمونه خون مشکوک به بروسلوز بیمارانی که از سال 96تا99به آزمایشگاه های تهران مراجعه کرده بودند، در محیط های کشت کاستاندا تلقیح گردید و در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 21 روز نگهداری شد. از کلنی هایی که در سطح محیط رشد کرده بودند DNA استخراج شد. ژن omp2a  بروسلا به روش PCR با استفاده از پرایمر اختصاصی تکثیر گردید. .محصولات PCR ، با آنزیم محدود کننده Pst1 ، هضم و الگو های RFLP حاصل مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.

از کل نمونه ها،در 10 مورد کلنی رشد کرد که تست های افتراقی جهت جداسازی گونه ها انجام شد.به روش PCR از نظر بروسلا تایید شد و در آزمایش RFLP ،در 8 نمونه گونه بروسلا ملی تنسیس و در 2 نمونه گونه بروسلا آبورتوس تشخیص داده شد.

در کشور ما بیماری بروسلوز وجود دارد و همچنان موارد ابتلا در برخی از روستاها مشاهده می شود و در بین این موارد ،گونه بروسلا ملی تنسیس نیز فراوانی بیشتری نسبت به سایر گونه ها دارد .

با روش های مولکولی به راحتی ، در کمترین زمان ممکن ، دقت و حساسیت بالا و با خطرکمتر ، می توان وجود بیماری و گونه های مختلف بروسلا را تشخیص داد.