بررسی تاثیر مهارکننده پروتئازوم (MG132) در تنظیم مرگ سلولی، آپوپتوز، فعالیت کاسپازها، میزان گونه های فعال اکسیژن و پتانسیل غشای میتوکندری در رده سلولی سرطان سینه (MCF-7)

MG132  به عنوان مهارکننده مسیر پروتیوزوم در تنظیم احتمالی مرگ سلول های سرطانی مورد توجه قرار گرفته است. این مطالعه با هدف روشن کردن اثر احتمالی MG132 بر تنظیم رشد و القای  آپوپتوز با تاکید بر نقش کاسپاز ها، گونه های فعال اکسیژن و میتوکندری در سلول های سرطانیMCF-7  طراحی شده است.

مطالعه حاضر از نوع مطالعات علوم پایه و در سطح سلول می باشد. برای این منظور، سلول های MCF-7 در گروه های تیمار با  غلظت های مختلف MG132 (0.5، 1، 5 و 10 میکرومول)  در زمان های انکوباسیون 12، 24 و 48 ساعت قرار گرفتند. اثر سمیت سلولی MG132 بر رشد MCF-7  با استفاده از روش MTT بررسی گردید. رنگ آمیزی Annexin-V-FITC و رنگ آمیزی PI برای تشخیص آپوپتوز اولیه و تاخیری  با استفاده از فلوسیتومتری استفاده گردید.  سطح پتانسیل غشای میتوکندری Δψm)) با استفاده از رنگ لیپوفیل  JC-1 تغییر رنگ و جذب نوری حاصل از آن،  تشکیل گونه های فعال  اکسیژن  (ROS) با استفاده از پروب فلورسنس 2′,7′ -dichlorofluorescin diacetate (DCFH-DA) و فعالیت کاسپاز های 3 و 8  به روش الایزا مورد بررسی قرار گرفت. برای تجزیه و تحلیل و مقایسه داده ها از تحلیل واریانس یک طرفه ناپارامتریک (ANOVA) با آزمون تعقیبی Dennet و آزمون تعقیبی توکی با استفاده از نرم افزار GraphPad Prism استفاده گردید.

یافته ها: 

بر اساس نتایج حاصل از این مطالعه،  MG132 باعث ایجاد القای مرگ سلولی در حالت وابسته به دوز و زمان در سلول های سرطانی MCF-7 گردید. کاهش درصد سلول های زنده پس از تیمار با غلظت های 5 و 10 میکرومول از MG132 پس از 48 ساعت منجر به افزایش درصد سلول های آپوپتوزی اولیه و نیز افزایش فعالیت آنزیم های کاسپاز 3 و کاسپاز 8 در این سلول ها گردید. همچنین نتایج این مطالعه نشان داد که القای آپوپتوز در سلول های MCF-7 بدنبال تیمار با MG132 با افزایش معنی دار تولید ROS درون سلولی  (01/0<P)  و نیز کاهش قابل توجه پتانسیل غشای میتوکندری (001/0<P) همراه است.

نتیجه گیری:

 نتایج مطالعه حاضر بر نقش موثر مهار سیستم پروتیوزوم ازطریق MG132 در توقف تکثیر سلول های MCF-7 و القای آپوپتوز و پتانسیل این ترکیب برای طراحی روش های درمانی موثرتر در کنترل رشد سلول های سرطانی سینه تاکید دارد.