ارزیابی اثر ترکیب اکسید گرافن-گلد بر روی رده سلولی HepG2

 یکی از مهم ترین تاثیرات نانو مواد بر سلول ها، القای فرآیند مرگ برنامه ریزی شده سلولی (آپوپتوز) می باشد. هدف از این مطالعه، بررسی اثر سمیت نانو ذره اکسید گرافن-طلا و ارزیابی بیان ژن کاسپاز 3 در رده سلول های سرطانی کبد HepG2 می باشد.

مواد و روش‌ها: 

در این مطالعه تجربی رده سلولی هپاتو سلولار کارسینوما (HepG2) از انستیتو پاستور تهران تهیه شد .از سلول های تیمار شده با غلظت های µg/ml 10 تا 500 از Gold-rGO و تیمار نشده به عنوان کنترل استفاده گردید. میزان بیان ژن کاسپاز 3 و میزان زنده مانی سلول ها در سه گروه کنترل C، گروه A و B در زمان های 24 و 48 ساعت بررسی و مقایسه شد. اثر غلظت به روش XTT و رنگ آمیزی آکریدین اورنج اتیدیوم بروماید بررسی شد. سنجش بیان ژن کاسپاز 3 به صورت کمی Relative quantification با استفاده از تست Real time PCR انجام شد.

یافته‌ها: 

بر اساس نتایج XTT مقادیر EC20، EC50، EC80 در زمان 24 ساعت به ترتیب µg/ml 386/420، 90/680، 24/151 و در زمان 48 ساعت g/mlµ 358/146، 89/536، 22/384 محاسبه شد. بررسی میزان تغییر سطح بیان ژن کاسپاز 3 در این غلظت ها در مقایسه با سلول های تیمار نشده در زمان های 24، 1/022±3/436Difference between means fold change±SEM=  و 48 ساعت 0/02±4/054 نشان داد که به صورت معنی داری میزان سطح بیان ژن تغییر می کند. میزان زنده ماندن سلول های کنترل (C) در مقایسه با سلول های تیمار شده با غلظت های بالاتر از 50 میکروگرم در میلی لیتر (B) افزایش نسبی دارد که از لحاظ آماری معنی دار است (0/0001>p). بررسی با رنگ آمیزی AO/EB برای تعیین میزان آپوپتوز با بیشتر شدن دوز میزان آپوپتوز بیشتری را نشان داد.

نتیجه‌گیری:

 نتایج مطالعه نشان داد که در کاربرد این نانو ذره باید از زمان های کوتاه تر و غلظت های پایین تر استفاده کرد.