ایمنی زایی پروتئین کایمر نوترکیب STXB-Intimin- EscC علیه بیماری زایی باکتری Enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7

انتروهموراژیک اشریشیا کلی سروتیپ O157:H7 یک عامل بیماری زای مهم در بین انسان و حیوانات است که باعث عارضه های گوارشی متعددی از جمله کولیت هموراژیک و در موارد حاد سندرم اورمی همولیتیک (HUS) می شود. با توجه به خطرات ناشی از درمان آنتی بیوتیک ها در عفونت E.coli O157:H7، واکسن ها روشی امیدبخش برای پیشگیر ی از این عفونت را ارایه می کنند. هدف از این تحقیق بررسی ایمنی زایی آنتی ژن کایمر (SEI) StxB-EscC-Intimin علیه باکتری E.coli O157:H7 بود. بیان پروتیین نوترکیب تحت تاثیر IPTG در E.coli BL21 DE3 القاء و توسط SDS-PAGE ارزیابی شد. پروتیین نوترکیب با ستون کروماتوگرافی تمایلی Ni-NTA خالص و به روش الایزا با استفاده از آنتی بادی اختصاصی ضد توکسین شیگا تایید گردید. ایمنی زایی در موش با پروتیین خالص انجام و تیتر آنتی بادی به روش ELISA تعیین شد. ریزش باکتری و مرگ و میر در موش ها مورد بررسی قرار گرفت. بررسی آماری با آزمون های دانکن و T-test با نرم افزار SPSS انجام شد. بیان پروتیین با وزن مولکولی 5/74 کیلو دالتون در SDS-PAGE مشاهده شد. حداقل مقدار آنتی ژن شناسایی شده با آنتی بادی مرغی ضد شبه شیگا با استفاده از روش ELISA 156نانوگرم بود. ریزش باکتری در موش ایمن تا cfu/ml 102 کاهش یافت و 80 درصد از موش های ایمن پس از تزریق LD5010 از باکتری زنده ماندند. نتایج نشان داد که پروتیین نوترکیب کایمر می تواند کاندید واکسن مناسبی علیه E.coli O157:H7 باشد.