بررسی تاثیر خاصیت fungicidal ایتراکونازول در مهار بیوفیلم کاندیدا آلبیکنس جهت ارائه راهکار درمانی مناسب در موارد recalcitrant onychomycosis

کاندیدا آلبیکنس توانایی کلونیزه کردن سطوح زنده و غیرزیست و تشکیل بیوفیلم هایی را دارد که در برابر ضدقارچ های رایج بسیار مقاوم هستند. مطالعه حاضر به منظور ارزیابی فعالیت قارچ کشی ایتراکونازول بروی بیوفیلم کاندیدا آلبیکنس طراحی شده است.

روش اجرا:

 مطالعه حاضر بر روی 10 نمونه ناخن انجام شد. آزمایش روتین قارچ شناسی و مولکولی جهت شناسایی و تعیین گونه قارچ انجام شد. بیوفیلم در پلیت 96 خانه تشکیل شد و در مجاورت ایتراکونازول قرار گرفت. تجمع گونه های اکسیژن فعال ROS اندازه گیری و سطح ROS در بیوفیلم های تیمارشده با ایتراکونازول در حضور آنتی اکسیدان تعیین شد. اندازه گیری حداقل غلظت مهاری ایتراکونازول در حضور اسید اسکوربیک (10 میلی مولار) براساس پروتکل مرحله قبل انجام شد. برای بررسی احتمال القای آپوپتوز به دنبال مصرف ایتراکونازول از کیت تشخیص آپوپتوز Annexin V-FITC استفاده شد.

Mann-Whitney تفاوت معنی داری را بین بیوفیلم های تیمارشده با ایتراکونازول و بیوفیلم های تیمارنشده برای 10 سویه آزمایش شده نشان داد. درمان با ایتراکونازول منجر به کاهش قابل توجهی در تعداد بیوفیلم شد. اسید اسکوربیک به طور قابل توجهی تجمع ROS ناشی از ایتراکونازول را برای بیوفیلم های همه سویه های کاندیدا آلبیکنس کاهش داد. یافته ها نشان می دهد که ایتراکونازول آپوپتوز وابسته به ROS را در یک حالت وابسته به دوز در سلول های بیوفیلم القا می کند.

در این مطالعه مشخص شد وجود ROS درون سلولی عامل اصلی مکانیسم آپوپتوز ایتراکونازول است. توانایی ایتراکونازول برای القای ROS در سلول های کاندیدا یک استراتژی قارچ کشی بسیار موثر به نظر می رسد.