طراحی روش اندازه گیری مقادیر رادیکالهای فعال اکسیژن در In Vitro و بررسی اثرات ویتامینهای C و E

رادیکال های آزاد و در راس آن ها ترکیبات مشتق از اکسیژن فعال(Reactive Oxygen Species=ROS) مهم ترین عوامل شکل گیری واکنش استرس اکسیداتیو هستند، امروزه آسیب رادیکالی به عنوان عامل موثری در بسیاری از بیماری ها از جمله آلزایمر، آترواسکلروز و سرطان در نظر گرفته می شود. هدف از این تحقیق، ارایه روشی جدید و سریع، برای اندازه گیری رادیکال های ROS است.
این مطالعه توصیفی - تحلیلی میزان رادیکال زایی یون های فلزات واسطه نظیر آهن، مس و وانادیوم در حضور ترکیبات تیول دار گلوتاتیون و سیستئین (به عنوان مواد احیا کننده) و اکسیژن مولکولی، در محیط Invitro با استفاده از آزمون تیوباربیتوریک اسید مورد سنجش قرا گرفت. برای اندازه گیری مقادیر رادیکال های آزاد تولیدی، از مولکول قند دزوکسی ریبوز، به عنوان معرف استفاده شد. در اثر حمله رادیکال های آزاد به دزوکسی ریبوز، تعدادی از ترکیبات آلدییدی نظیر مالون دی آلدهید، تولید شد. سپس مالون دی آلدهید حاصل، با شناساگری به نام تیوباربیتوریک اسید ترکیب شد و محصول رنگی به دست آمده دارای حداکثر جذب در طول موج 532 نانومتر بود. همچنین در این تحقیق، اثرات دو ویتامین آنتی اکسیدان یعنی C و E بر روی میزان رادیکال زایی یون های فلزات مورد مطالعه، بررسی شد.
نتایج حاصل نشان داد که وانادیوم در مقایسه با آهن و مس، دارای بیشترین توان رادیکال زایی بود و از بین آهن و مس، بسته به این که محیط شامل سیستیین یا گلوتاتیون بود با یکدیگر تفاوت داشت. همچنین ویتامین های C و E، بر روی ساخت رادیکال آزاد در هر سه یون مورد استفاده، اثرات مهاری داشتند. به خصوص ویتامین C در غلظت صد میکرو مولار، دارای بیشترین تاثیر (83 درصد) بر روی کاهش تولید رادیکال بود.
این مطالعه مشخص بود که واکنش فلزات واسطه با مواد تیول دار در حضور اکسیژن، منجر به تولید رادیکال های ROS می شود و ویتامین های C و E رادیکال زایی را مهار می کنند.