استفاده از مولتی پلکس PCR در شناسایی حذف های شایع ژن آلفاگلوبین در حاملین آلفاتالاسمی

آلفاتالاسمی شایع ترین اختلال توارثی سنتز هموگلوبین دردنیا می باشد. آلفاتالاسمی عمدتا حاصل حذف یک یا هر دو ژن آلفا موجود در کروموزوم 16 می باشد. حاملین اشکال حذفی آلفاتالاسمی (aa/- - یا a-a-، aa/a-) از نظر بالینی طبیعی بوده ولی کم خونی هیپوکروم، میکروسیتیک دارند. هتروزیگوت های مرکب (a-/- -) کم خونی نسبتا شدیدی دارند و بیماری HbH نامیده می شود. جنین هایی که هیچ ژن آلفایی به ارث نمی برند (–/–) (سندرم هیدروپس فتالیس) در دوران جنینی یا مدت کوتاهی بعد از تولد می میرند. بیش از 95% آلفاتالاسمی شناخته شده خذف یک یا هر دو ژن آلفاگلوبین موجود بر روی کروموزوم 16 را دارند.
آزمایش بر روی 114 فرد ایرانی با MCV و MCH پایین و HbA2 نرمال که به درمان آهن هم پاسخی ندادند از طرف مراکز بهداشتی کشور به انستیتوپاستور ایران ارجاع داده شده بودند، انجام گرفت. DNA ژنومی از سلول های سفید خونی به روش Salting Out تخلیص گردید. دراین تحقیق در یک لوله منفرد Multiplex-PCR برای هفت حذف (FIL, -a20.5, –MED, –a4.2, -a3.7, –SEA, –THAI) آلفاتالاسمی انجام گردید.
DNA حاملین آلفاتالاسمی برای وجود انواع متفاوت جهش های ژن آلفاگلوبین مورد آزمایش قرار گرفتند. جهش های ژنی (حذفها) درتعدادی از نمونه های مورد مطالعه شناسایی گردیدند. این حذف ها شامل: حذف های تک ژن -a3.7 و -a4.2 و حذف های دو ژنی مدیترانه ای –MEDو –a20.5 بودند. حذف -a3.7 شایع ترین حذف ژن آلفاگلوبین در نمونه های مورد مطالعه می باشد. Multiplex-PCR روشی ساده، سریع و حساس برای تعیین حذف های ژن آلفاگلوبین می باشد.