استفاده از رنگ آمیزی ایمونولوژیک در تشخیص بابزیوز و تیلریوز و بیان ژن پروتئین هسته وابسته به تکثیر سلولی در سلول های آلوده به تیلریا

هدف از تجربه حاضر بکارگیری یک روش مفید به منظور شناسایی و تفکیک اجرام تک یاخته ای مانند بابزیا وتیلریا می باشد. بدین منظور نمونه های خونی با روش رنگ آمیزی ایمنولوژیک پراکسیداز یگانه با بهره گیری از سرم های مثبت مورد مطالعه قرار گرفت و در مورد نمونه های سلولی لکوسیتی آلوده به تیلریا از کشت سلول های لکوسیتی با روش رنگ آمیزی دوگانه بهره گرفته شد. پیروپلاسم های بابزیا اویس و تیلریا لستوکاردی در رنگ آمیزی ایمنولوژیک یگانه به صورت لکه های کروی قهوه ای در گلبول های قرمز قابل رویت بودند. در رنگ آمیزی لکوسیتی آلوده به تیلریا آنولاتا با سرم خرگوش ایمن شده با پروتئین نوترکیبی شوک حرارتی 70 میتوکندری شیزونت ها، حضور ماکروشیزونت های تیلریا آنولاتا از طریق رنگ آمیزی آلکالین فسفاتاز آنتی آلکالین فسفاتاز مشخص گردید. همچنین سلول های فوق با روش رنگ آمیزی ایمنولوژیک دوگانه نیز مورد مطالعه قرار گرفتند و شیزونت های داخل سلول های آلوده از طریق پادتن اختصاصی با روش آلکالین فسفاتاز آنتی آلکالین فسفاتاز داخل سیتوپلاسم و پروتئین هسته وابسته به تکثیر سلول Ki-67 با استفاده از پادتن مونوکلونال و روش پراکسیداز داخل هسته به طور همزمان رنگ آمیزی گردیدند. شیرونت ها به صورت لکه های کروی قرمز در سیتوپلاسم و هسته حاوی پروتئین هسته وابسته به تکثیر سلول Ki-67 به صورت قهوه ای آشکار شدند. نتایج حاصله نشان می دهند که با روش ایمنولوژیک می توان پیروپلاسم های بابزیایی و تیلریایی را از یکدیگر تفکیک نمود. همچنین به نظر می رسد که روش ایمنولوژیک به عنوان یک روش استاندارد و مکمل جهت تعیین پروتئین های انگلی و آنالیز بیان ژن در سلول ها علاوه بر روش western blot قابل استفاده باشد.