تشخیص ویروس زبان آبی توسط روش RT-PCR در گوسفند

طی سال 87-1386تعداد 120 نمونه خون از گوسفندانی که دارای علائم بالینی مشکوک به زبان آبی بودند،اخذ گردید.نمونه ها از کانون هایکه از نظر سرولوژیک وجود ویروس در آنها اثبات شده بودجمع آوری گردید. پس از جدا سازی سرم، توسط الیزای رقابتی آنتی بادی ضد آنتی ژن 7VP در آنها رد یابی گردید. کل ژن 7S بطول bp1156توسط RT- PCR one step وبا استفاده ازدو زوج پرایمر اختصاصی مکمل انتهای3 و 5 قطعه مذبور تکثیر یافت. در تعدادقابل توجهی از نمونه ها باند bp1156بشکل ضعیف یا غیر واضح مشاهده شد.برای رفع این مشکل از آزمایش nested-PCR با بکارگیری پرایمرهای داخلی ژن 7S استفاده گردید.باند حاصل قطعه ای بطول bp769 بود.به این وسیله علاوه بر تایید نتایج PCRاول حساسیت شناسای ویروس افزایش یافت.از بین نمونه های مورد آزمایش، 41 مورد (2/34 درصد) از نظروجود آنتی بادی ضد گروه سرمی زبان آبی، 23 مورد(2/19درصد) از نظر nPCR، 12 مورد (10 درصد) از نظر الیزا و nPCR مثبت و 56مورد (46.6درصد) از نظر الیزا و nPCR منفی تشخیص داده شدند. این مطالعه اولین گزارش در خصوص بکارگیری RT-PCR جهت شناسایی ویروس زبان آبی در ایران است.از RT- PCR و nested PCR به عنوان یک روش بسیار حساس مولکولی جهت شناسایی ویروس زبان آبی در نمونه های خون می توان بهره برد.