شناسایی پوتی ویروس غالب در مزارع ذرت استان تهران و بررسی پاره ای از خصوصیات آن

طی فصل زراعی سال 1382 تعداد 231 نمونه برگی از ذرت های آلوده به ویروس و دارای علایم موزائیک و در مواردی علایم موزائیک همراه با کوتولگی، از مزارع ذرت مناطق مختلف استان تهران جمع آوری گردید. با استفاده از آنتی سرم های پلی کلونال چهار پوتی ویروس MDMV،SCMV، SrMV وJGMV بر روی نمونه ها آزمون های سرولوژیکیDAS-ELISA، DIBA و TPIA انجام گردید. در پایان، تمامی نمونه ها با آنتی سرم ویروس موزائیک نیشکر(SCMV) واکنش قوی بروز دادند و واکنشی با آنتی سرم سه پوتی ویروس دیگر مشاهده نگردید. نمونه ها در بافر فسفات پتاسیم 1/0 مولار (pH 7) حاوی 2 درصد پلی وینیل پایرولیدون (PVP) عصاره گیری و جدایه ها در گلخانه بر روی ذرت شیرین رقم 403 پارس و سورگوم دانه ای رقم کیمیا مایه زنی و تکثیر گردیدند. در آزمون های سرولوژیکی مجدد بر روی گیاهان مایه زنی شده نیز تنها حضورSCMV در آنها محرز گردید. در مطالعه دامنه میزبانی، جدایه های منتخبSCMV به روی Avena sativa، Panicum miliaceum، Pennisetum americanum Triticum aestivum، Hordeum vulgare و Setaria italica منتقل نشدند. خالص سازی ویروس به روش Minipurificationبر روی 2 گرم از بافت گیاهی آلوده انجام و غلظت ویروس خالص و نسبت A260/280 برای آن به ترتیب mg/ml 45/11 و 2/1 محاسبه شد. در بررسی الکترون میکروسکوپی به روش تلفیق سرولوژی و الکترون میکروسکوپی (ISEM) و دکوراسیون با آنتی سرم SCMV، پیکره های رشته ای قابل انعطاف SCMV در نمونه ها مشاهده و عکس برداری انجام شد. با انجام آزمون های SDS-PAGE و Western blotting بر روی نمونه های گیاهی آلوده و سوسپانسیون های ویروس خالص، وزن مولکولی پروتئین پوششی SCMV در حدودKDa 38-37 بود. آزمونRT-PCR با استفاده از جفت پرایمر SCMVF3 و SCMV R3 انجام گرفت و قطعات تکثیر یافته در حدود bp 900 بودند که تاییدی مضاعف بر حضور ویروس SCMVدر نمونه ها بدست آمد. بر اساس تحقیق حاضر ویروس موزائیک نیشکر پوتی ویروس شایع و غالب و عامل اصلی موزائیک و موزائیک کوتولگی در مزارع ذرت استان تهران می باشد.