کلونینگ و توالی یابی ژن کامل راپتری دو (ROP2) از توکسوپلاسماگوندی

توکسو پلاسما گوندی یک تک یاخته داخل سلولی می باشد که باعث بیماری توکسو پلاسموزیس در انسان و حیوانات می شود. بیمارانی که نقص سیستم ایمنی دارند، عفونت مزمن این بیماری می تواند دوباره فعال شده و باعث آنسفالیت شود که اغلب کشنده می باشد. پروتئین راپتری 2 توکسو پلاسما گوندی(ROP2) یکی از میانجی های مهم در آمیزش ارگانل-PVM می باشد. پروتئین ROP2 در بدن انسان توسط کلون Tcell شناسایی می شود. همچنین ROP2 برای Bcell دارای اپی توپ می باشد. همه این ویژگی های ROP2 باعث شده که از این پروتئین به عنوان کاندید برای تهیه واکسن های نوترکیبی و کوکتلی علیه توکسوپلاسموزیس استفاده شود.
نتایج این تحقیق نشان داد که با موفقیت ژن کامل ROP2 در داخل پلاسمید pTZ57R/T کلون شده است و از این پلاسمید نوترکیب (pT-ROP2) می توان برای ساختن DNA واکسن بر علیه توکسوپلاسموزیس استفاده کرد. این پژوهش نشان داد که ژن کامل ROP2 در داخل پلاسمید pTZ57R/T کلون شده و پلاسمید نوترکیب (pT-ROP2)را تشکیل می دهد. توالی یابی ژن کامل ROP2 که در داخل وکتور pTZ57R/T کلون شده است، نشان دادکه توالی ژن کامل ROP2 از سوش بسیار بیماریزای توکسوپلاسما گوندی (معروف به سوش RH)شباهت زیاد 98 درصدی با سوش RH موجود در بانک ژنی دارد. (Gen bank Accession No.Z36906.1).
در این مقاله کلونینگ و توالی یابی ژن کد کننده پروتئین کامل ROP2 از توکسوپلاسما گوندی توصیف خواهد شد. در این تحقیق، ابتدا DNA ژنومی توکسوپلاسما گوندی استخراج شده و از آن برای تکثیر ژن کامل ROP2 با استفاده از پرایمرهای اختصاصی طراحی شده استفاده گردید.سپس محصول PCR در داخل وکتور pTZ57R/T کلون شده و متعاقبا پلاسمید کلون شده در باکتری E.Coli ترانس فورم شده و به دنبال آن پلاسمید حاوی ژن کامل ROP2(pT-ROP2)که توسط هضم آنزیمی و PCR تایید شده بود، از باکتری های ترانس فورم شده، استخراج گردید و از آن برای توالی یابی ژن کامل ROP2 استفاده گردید