تعیین فعالیت آنزیم تیمیدین فسفریلاز گلبول های سفید و تیمیدین پلاسما در بیماران MNGIE به روش کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا- فاز معکوس (RP-HPLC)

تیمیدین فسفریلاز (TP) تبدیل تیمیدین به تیمین را کاتالیز می کند. Mitochondrial NeuroGastroIntestinal Encephalomyopathy (MNGIE) یک بیماری اتوزومی مغلوب است که در نتیجه جهش در ژن هسته ای TP، از دست رفتن شدید فعالیت آنزیم و تجمع تیمیدین در پلاسما ایجاد می گردد. تظاهرات بالینی این بیماری در مراحل ابتدایی قابل تشخیص نمی باشند. در افراد مشکوک به MNGIE تعیین فعالیت تیمیدین فسفریلاز در گلبول های سفید و اندازه گیری مقدار تیمیدین پلاسما ارزش تشخیصی دارند.
روش هایی که تا به حال برای اندازه گیری فعالیت تیمیدین فسفریلاز و میزان تیمیدین پلاسما مورد استفاده قرار گرفته اند از سرعت، دقت و صحت کافی برخوردار نبوده اند. ما فعالیت آنزیم تیمیدین فسفریلاز در گلبول های سفید بیماران دارای علایم بالینی MNGIE و افراد کنترل را به روش RP-HPLC سنجش کردیم. تیمیدین پلاسما نیز به همین روش اندازه گیری شد.
در تحقیق ما غلظت تیمیدین پلاسمای افراد بیمار بیش از سه میکرومول بر لیتر و در افراد سالم غیر قابل اندازه گیری و پایین تر از حد اندازه گیری دستگاه ما بود. فعالیت آنزیمی در افراد بیمار کمتر از 5% افراد کنترل بود (nmol/h/mg4±14 در مقابل nmol/h/mg165±525 با 05/0P<). این نتایج یک الگوریتم تشخیص قطعی را بر اساس اندازه گیری تیمیدین پلاسما یا فعالیت تیمیدین فسفریلاز در گلبول های سفید و یا هر دو ارایه کردند.
ما یک روش سریع و دقیق را برای سنجش فعالیت آنزیم به روش RP-HPLC در ایران راه اندازی کردیم و توانستیم مقادیر مرجعی را برای میزان تیمیدین پلاسما و میزان فعالیت آنزیم TP برای بیماران ایرانی به دست آوریم.