شناسایی باکتری اشریشیا کلی O157:H7 تولید کننده شیگاتوکسین در نمونه های شیر خام گاوداری های اطراف مشهد به روش PCR چندگانه

در این بررسی، در طول ماه های تابستان به صورت تصادفی 130 نمونه شیر خام از تانکرهای شیر که به کارخانه شیر پگاه تحویل داده می شد نمونه گیری گردید. جهت جداسازی باکتری اشریشیا کلی O157:H7 نمونه ها ابتدا در محیط آبگوشت تریپتیک سوی حاوی نووبیوسین غنی سازی گردید و سپس در محیط آگار انتخابی CT-SMAC حاوی سیفیکسیم و تلوریت پتاسیم کشت داده شد. کلنی های غیر تخمیر کننده سوربیتول (NSF) با استفاده از آزمایش های بیوشیمیایی (IMViC) به عنوان اشریشیا کلی مورد تایید قرار گرفتند، سپس به روش PCR چندگانه (m-PCR) و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ژن کد کننده آنتی ژنهای O157 و H7 و پس از آن پرایمرهای اختصاصی ژن های stx1 و stx2 مورد آزمایش قرار گرفتند. در این مطالعه 8 نمونه کلنی های اشریشیا کلی NSF جداسازی گردید. در آزمایش m-PCR یک (77/0%) نمونه آلوده به سروتیپ O157:H7 تشخیص داده شد و در آزمایش m-PCR دوم مشخص گردید که باکتری جداسازی شده حاوی ژن stx2 می باشد. روش مورد استفاده می تواند به عنوان روش جایگزین روش های ایمونولوژیک که حضور آنتی ژنهای سوماتیک و تاژک را مورد شناسایی قرار می دهند مطرح باشد و علاوه بر آن توان توکسین زائی آن ها را نیز مشخص می نماید.