بررسی توانایی پروتئین نوترکیب core+1 ویروس هپاتیت C برای القای پاسخ های ایمنی در ترکیب با ادجوانت های مختلف

ژنوم ویروس هپاتیت C در بر گیرنده یک قاب خواندن طویل و کد کننده نوعی پلی پروتئین است که در نهایت این پلی پروتئین برش خورده و به 10 پروتئین ویروسی تبدیل میشود. مطالعات اخیر نوعی پروتئین جدید با نام core+1 را گزارش کردند که با یک شیفت ریبوزومی1+ در داخل سکانس مولد پروتئین کپسید ویروس (core)، ساخته میشود. ویژگی هایی مانند تخریب سیستم ایمنی، مهار آپاپتوز و حضور آنتی بادی ضد core+1در بیماران کبدی نشان دهنده نقش این پروتئین در پاتوژنز HCV و توانایی به کارگیری این پروتئین در توسعه واکسن علیه HCV است. بدین منظور پروتئین core+1 در E.coli تولید و سپس ویژگی های ایمونولوژیکی آن بررسی گردید.
توالی نوکلئوتیدی مربوط به core+1 با روش PCR تکثیر و در وکتور PET 24-a به منظور بیان پروتئین نوترکیب در باکتری E.coli کلون گردید. پروتئین بیان شده در شرایط دناتوره کننده تخلیص شده و سپس با روش SDS-PAGE و وسترن بلات مورد بررسی قرار گرفت. ایمنی زایی core+1 در ترکیب با ادجوانتهای فروند (C/IFA)، مانتانید ISA 206 و IMS 1312، پلورونیک اسید (F127) و imiquimod ((IMIQ در موشهای Balb/c ارزیابی شده و با روش الایزا، پاسخ ایمنی همورال بررسی گردید. این مطالعه برگرفته از پایان نامه دانشجویی میباشد.
پروتئین core+1 به میزان 5mg/l تولید و سپس آنتی ژنیسیته این پروتئین با وسترن بلات تائید گردید. همه فرمولاسیونهای ادجوانتی به طور معنی داری پاسخ آنتی بادی علیه core+1 را در موشهای ایمن شده نشان داده و C/IFA و ISA206 بالاترین تیتر آنتی بادی را داشتند. گروه های ISA 206 و IMS 1312 هر دو پاسخ Th1/Th2 را نشان دادند.
نتایج نشان میدهد که core+1 در ترکیب با ادجوانتهای مختلف میتواند پروفایل متفاوتی از پاسخهای ایمنی (Th1/Th2) را ایجاد کند. بنابراین این پروتئین میتواند به عنوان ترکیبی از واکسن HCV مدنظر قرار گیرد.