شناسایی و ردیابی ژن Tri16 در فوزاریوم های مولد و غیر مولد تریکوتسن از نوع سم T-2 به روش PCR

سم 2 T- سمی ترین تریکوتسن است و اغلب توسط فوزاریوم اسپوروتریکیوئیدس تولید می شود. این مایکوتوکسین محصولات کشاورزی و به ویژه غلات را آلوده نموده و می تواند سبب بیماری های شدید و حتی مرگ در انسان شود. در مسیر بیوسنتز سم 2 T- ژن 16 Tri، اسیل ترانسفرازی را کد می کند که تشکیل گروه جانبی استر را در کربن شماره 8 کاتالیز می کند. هدف اصلی این مطالعه، طراحی روش مولکولی براساس ژن 16 Tri به منظور شناسایی فوزاریوم های مولد سم 2 T- بود.
در این مطالعه از نوع تجربی تعداد 111 سویه فوزاریوم (شامل 22 سویه استاندارد و 89 ایزوله فوزاریوم) مورد بررسی قرار گرفت. پس از خالص سازی سویه ها و تهیه کشت انبوه در محیط پتیتودکستروزبراث (PDB)، استخراج DNA آنها با استفاده از نیتروژن مایع و با کمک بافرهای لیزکننده و محلول های فنل- کلروفرم- ایزوآمیل الکل (PCI) صورت گرفت. با استفاده از پرایمرهای طراحی شده و انتخابی براساس ژن 16 Tri و بهینه نمودن PCR این ژن در تمام سویه های مولد و غیرمولد سم 2 T- ردیابی شد.
تمام ایزوله های فوزاریوم مولد سم 2 T- شامل 4 ایزوله فوزاریوم اسپوروتریکوئیدس، یک گونه فوزاریوم پوئه و یک گونه فوزاریوم لانگستیه محتوی قطعه ژن 16 Tri (1380 جفت باز) بودند.
با پروتکل مولکولی طراحی شده براساس ژن 16 Tri، می توان گونه های مهم مولد سم 2- T مانند فوزاریوم اسپوروتریکیوئیدس و فوزاریوم لانگستیه را شناسایی کرد. همچنین می توان گونه هایی از فوزاریوم که به طور ضعیف مولد 2- T هستند را نیز شناسایی نمود.