فهرست مطالب

فصلنامه فیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان
سال دوم شماره 3 (پاییز 1393)

  • تاریخ انتشار: 1393/08/08
  • تعداد عناوین: 6
|
  • محسن جعفری نژاد، مجید عسکری حصنی، اکبر کریمی، نرگس امرالهی بیوکی، مینا معتمدی صفحات 1-12
    مطالعه میزان تاثیرپذیری شاخص های سرمی می تواند معیار خوبی برای ارزیابی تاثیر سمیت حشره کش در محیط باشد. در این مطالعه اثرات سم فن پروپاترین بر میزان سدیم، پتاسیم و کورتیزول خون ماهی کپور معمولی بررسی شد. در ابتدا غلظت سمیت حاد کشنده (LC50) به مدت 96 ساعت و بر اساس روش استاندارد O.E.C.D (1989) تعیین شد. پس از تعیین سمیت حاد، نمونه ماهیان در سه تیمار با غلظت های 5، 10 و 20 درصد حد کشندگی (14 میکروگرم در لیتر سم فن پروپاترین) و یک تیمار شاهد با سه تکرار قرار گرفتند. در هر تیمار 54 قطعه ماهی سالم با میانگین وزنی2/1±10 گرم و میانگین طول استاندارد 6/0±8/7 سانتی متر قرار داده شد. آزمایش تحت کشندگی به مدت 14 روز انجام گرفت و در زمان های 1، 7 و 14 روز پس از شروع آزمایش خون گیری صورت پذیرفت و میزان سدیم، پتاسیم و کورتیزول پلاسمای خون ماهیان در هر تیمار سنجیده شد. با توجه به نتایج به دست آمده، با افزایش غلظت فن پروپاترین میزان سدیم پلاسما کاهش و پتاسیم افزایش معنی داری داشت. میزان کورتیزول پلاسمای خون در تمام تیمارها، در روز اول افزایش قابل ملاحظه ای نسبت به گروه شاهد نشان داد (05/0P<) و پس از آن به تدریج کاهش یافت. بنابراین می توان نتیجه گرفت که سم فن پروپاترین تاثیر مستقیمی بر مکانیسم استرس و تنظیم اسمزی ماهی کپور معمولی دارد.
    کلیدواژگان: سموم کشاورزی، فاکتورهای خونی، تنظیم اسمزی، ماهی کپور معمولی
  • میلاد اسماعیل بیگی، محمدرضا کلباسی صفحات 13-30
    الکتروفورز سلول های منفرد روشی است که برای سنجش آسیب DNA استفاده می شود. این روش به علت سهولت و سرعت بالا نسبت به روش های دیگر مورد توجه قرار گرفته است. در مطالعه حاضر با اعمال برخی از تغییرات، روش مرسوم سنجش کامت قلیایی با استفاده از سلول های منفرد کبد ماهی سفید دریای خزر(Rutilus frisii kutum) بهینه سازی شد. برای این منظور 10 عدد ماهی انگشت قد با وزن متوسط 1±7 گرم و میانگین طول کل 2±10 سانتی متر تهیه شد و از بافت کبد آن ها نمونه برداری شد. نمونه ها تا شروع آزمایش ها در فریزر 80- قرار داده شدند. در بهینه سازی روش مذکور برای دستیابی به سلول های انفرادی مراحل مختلف سانتریفیوژ حذف شد، مدت زمان انجماد ژل روی اسلاید ها کاهش و مدت زمان حذف دیواره سلولی با بافر لیز کننده افزایش پیدا کرد و در نهایت روشی ساده برای آرشیو لام های رنگ آمیزی شده با اتیدیوم بروماید به مدت حداقل دو هفته ارائه شد. نتایج نشان داد علاوه بر کاهش مدت زمان و مواد و وسایل مصرفی، احتمال خطا نیز کاهش یافت. همچنین شاخص های آزمون کامت مانند طول کامت، ارتفاع کامت، طول دنباله، درصد DNA در دنباله و Tail Moment در مقایسه با روش بهینه سازی شده اختلاف معنی داری را نشان نداد (05/0P>).
    کلیدواژگان: ژل الکتروفورز تک سلولی، DNA، ماهی سفید دریای خزر، Rutilus frisii kutum
  • سیما راهی، بهروز حیدری، مهدی رسا صفحات 31-45
    مطالعه حاضر در رابطه با اثرات ضدقارچی اجزای مختلف توتیای دریایی Echinometra mathaei صورت گرفته است. گنادها، پوسته، خارها و بخش دهانی توتیای دریایی مورد مطالعه قرار گرفتند. از سویه های قارچی Candida albicans، Candida glabrata و Candida parapsilosis به دلیل بیماری زا بودن و شیوع فراوان آن ها استفاده شد. توتیای دریایی از سواحل خلیج فارس جمع آوری شد و پس از کالبدشکافی، از بخش دهانی، گناد، پوسته و خار توتیای دریایی توسط سه حلال سدیم بافر فسفات، اتانول و استونیتریل عصاره گیری به عمل آمد. فعالیت ضدقارچی عصاره ها، با استفاده از روش Well Diffusion، در دو غلظت 600 و μg/well 1500، مورد ارزیابی قرار گرفت. فعالیت ضدقارچی پوسته و گناد و همچنین خار (علیه یکی از سویه های قارچی) مشاهده شد. عصاره بخش دهانی در همه آزمایش ها فاقد فعالیت ضدقارچی بود. بنابر نتایج، پیشنهاد می شود که بخش پوسته و گناد توتیای دریایی جهت استخراج ترکیبات موثر در مطالعات آینده، در اولویت قرار گیرد.
    کلیدواژگان: توتیای دریایی، خلیج فارس، قارچ Candida
  • نگین درخشش، عبدالعلی موحدی نیا، نگین سلامات، محمود هاشمی تبار، وحید بیاتی صفحات 47-67
    در این مطالعه، میزان فعالیت آنتی اکسیدان های آنزیمهای کاتالاز و سوپراکسید دیسموتاز در دو مدل آزمایشگاهی (استفاده از کشت سلول) و مدل طبیعی (استفاده از جاندار) و در گروه های وزنی 100، 500 و 900 گرمی با یکدیگر مقایسه شدند. در بخش نخست این مطالعه به منظور انجام روش کشت سلولی از 5 قطعه ماهی هامور معمولی استفاده شد. ابتدا بدن ماهی ضدعفونی شده و پس از جدا کردن بافت کبد، بافت ها توسط آنزیم کلاژناز تیپ 4 هضم و به مدت 2 هفته در دمای C°30 در انکوباتور و محیط کشت Lebowitz (L-15) کشت داده شدند. در بخش دوم این پژوهش از تعداد 3 قطعه ماهی هامور معمولی استفاده شد. مطابق با نتایج حاصل از این مطالعه، اختلاف آماری معنی داری در بین دو مدل تحت مطالعه، مشاهده شد (05/0P˂). بررسی میزان همبستگی بین میزان فعالیت آنزیم های آنتی اکسیدانی در گروه های وزنی نیز بیانگر وجود همبستگی معنی دار در بین گروه ها بود (05/0P˂). در مجموع با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه، می توان به این نتیجه دست یافت که در مطالعات زیست شناختی، به جای استفاده از موجود زنده از روش کشت سلولی استفاده کرد.
    کلیدواژگان: کاتالاز، سوپراکسیددیسموتاز، کشت اولیه سلول های کبدی
  • کاوه نوروزی، محمدرضا کلباسی، پروانه فرزانه، سیدابوالحسن شاهزاده فاضلی، مریم فرقدان، احمد نسیمیان، مهرناز ایزدپناه، سپیده آشوری موثق، شیوا محمدی، زهرا مرادمند، منصوره فرهنگ نیا صفحات 69-88
    امروزه کشت سلول ابزار بسیار مفیدی برای پاسخ به بسیاری از سوالات در زمینه ی زیست شناسی محسوب می شود و کاربرد رده های سلولی روز به روز در حال افزایش است. در این مطالعه تولید کشت اولیه و Cell line ماهی آزاد دریای خزر (Salmo trutta caspius) مورد بررسی قرار گرفت و دو روش کشت اولیه Explant و روش جداسازی آنزیمی به کمک آنزیم تریپسین به منظور تولید کشت اولیه استفاده شد. مهاجرت سلول از باله های سینه ای، پشتی، دمی و مخرجی در روش Explant با یکدیگر مقایسه شد. تاثیر مدت زمان های مختلف تماس با تریپسین بر روی سلول ها با یکدیگر مقایسه شد. محیط کشت Leibovitz’s L-15 به همراه %20 FBS و %1 Pen-Strep استفاده شد. به منظور ارزیابی رده تولید شده، از سلول ها کاریوتیپ تهیه شد و در نهایت این سلول ها با کمک DMSO فریز شدند و به دمای C ̊196- منتقل شدند. محاسبات کارایی کشت بافت نشان داد که باله سینه ای با میانگین %31/71 بهترین باله به منظور تولید رده سلولی از این ماهی است. در مقایسه کلی بین روش های کشت اولیه، در روش جداسازی آنزیمی با آنزیم تریپسین نسبت به روش Explant، سلول های زنده بیش تری حاصل شد. عدد کروموزومی سلول ها 80=n2 بود و درصد زنده مانی بعد از گذشت یک ماه در ازت مایع %4/84 بود . با توجه به اینکه این سلول ها تا 22 نوبت پاساژ و انجماد و ذوب متوالی، از قابلیت رشد خوبی برخوردار بوده اند، از آن ها می توان در مطالعات مختلف استفاده کرد. این سلول ها به عنوان اولین رده سلولی Cell Strain) ) از آبزیان تولید شده در کشور در بانک سلول های جانوری مرکز ذخائر ژنتیکی و زیستی ایران (IBRC) با کدهای CS2-1، CS2-2 و CSe و شماره دستیابی 3-IBRC C10190 نگهداری می شود.
    کلیدواژگان: ماهی آزاد دریای خزر، کشت اولیه سلول، رده سلولی اپیتلیالی
  • خدیجه خلیفی، نگین سلامات، عبدالعلی موحدی نیا، امیر پرویز سلاطی صفحات 89-105
    از مهم ترین اکوسیستم های خلیج فارس که به شدت متاثر از آلودگی بوده، خور موسی است. هدف این مطالعه استفاده از تغییرات پاتولوژیکی آبشش جهت بررسی اثرات آلاینده های خور موسی بر گونه کفشک راستگرد است. در این مطالعه 100 قطعه ماهی کفشک راستگرد (Euryglossa orientalis) از پنج ایستگاه در خور موسی شامل: پتروشیمی، جعفری، مجیدیه، غزاله و زنگی جمع آوری شد و نمونه های آبشش بر اساس روش های مرسوم بافت شناسی مورد مطالعه قرار گرفت. تغییرات مشاهده شده در آبشش شامل هیپرتروفی و هیپرپلازی سلول های اپیتلیالی، تلانژیکتازی و تجمع خون در مویرگ های تیغه ای، ادم تیغه ای، اتصال تیغه ها، بی نظمی تیغه ها و برآمدگی اپیتلیوم تیغه ای بود. درجه تغییرات بافتی آبشش ماهی کفشک راستگرد در ایستگاه ها تابع الگوی پتروشیمی≥ مجیدیه> غزاله> جعفری> زنگی بود. نتایج نشان داد تغییرات ساختار بافت آبشش ماهی کفشک راستگرد رابطه مستقیمی با میزان آلودگی ایستگاه های مختلف خور موسی دارد.
    کلیدواژگان: خلیج فارس، آلودگی محیطی، هیستوپاتولوژی، کفشک راستگرد
|
  • Mohsen Jafarinejad, Majid Askari Hesni, Akbar Karimi, Narges Amrollahi Biuki, Mina Motamedi Pages 1-12
    The study of the influence of serum indices can be a good indicator to assess the toxicity of pesticides in the environment. In this study¡ the effects of Fenpropathrine on plasma Na¡ K and cortisol level of common carp¡ Cyprinus carpio was investigated. The acute toxicity concentration (LC50) was determined for 96 hours according to O.E.C.D (1989) standard method. Then fish specimens were exposed to 5¡ 10 and 20% of LC50 (14µg/l) and also control group with three replicates. In each treatment¡ 54 healthy fish specimens (mean standard length: 7.8±0.6cm; mean weight: 10±1.2 g) were used. Sub lethal experiment was conducted for a period of 14 days and blood sampling was collected at 1¡ 7 and 14th day post exposure time. Plasma Na¡ K and cortisol levels were measured. The results show that plasma K levels of the exposed specimens increased and levels of plasma Na decreased significantly. Plasma cortisol levels increased in all treatments compared to control during the first day¡ and then decreased gradually. In conclusion¡ Fenpropathrine have direct effect on common carp stress and osmoregulation mechanisms.
    Keywords: Agriculture Pesticides, Blood Factors, Osmoregulation, Cyprinus carpio
  • Milad Esmaeilbeigi, Mohammad Reza Kalbassi Pages 13-30
    Single-cell gel electrophoresis (SCGE) is a method that used to evaluate DNA damage in single cells. This method due to its great precision and high operating speed, considered than to other methods. The present study was performed to optimize some of the alkaline comet assay steps by using Caspian kutum )Rutilus frisii kutum( liver single cells. Hence, one batch of the fish fingerlings was used for the experiment (n=10, 7±1g) and fish liver tissues were dissected and transferred to freezer (-80C°) until starting the optimizing procedure and other common methods for comet assay tests. In optimization of conventional method for obtain single cells, centrifuging steps were deleted. Also, the solidification of gel on slides decreased and lysing time of cell membrane increased. Finally, a simple way to archive slides stained with ethidium bromide was present for at least two weeks. In addition to reducing experimental time and consumption materials, the optimized method led to lower cell damage and possibility of artificial error. No significant differences were observed between comet indexes, such as comet length (px), comet height (px), tail length (px), DNA% in tail and tail moment, achieved from the optimized and conventional method.
    Keywords: Single, cell Gel Electrophoresis, SCGE, DNA, Caspian Kutum, Rutilus frisii kutum
  • Sima Rahi, Behrooz Heidari, Mehdi Rassa Pages 31-45
    In the present study, antifungal effects of different components extracts in the Persian Gulf sea urchin Echinometra mathaei were investigated. It was used from fungi including Candida albicans, Candida glabrata and Candida parapsilosis due to the pathogenicity and prevalence of them. The samples of sea urchin were collected from the coasts of the Persian Gulf, dissected, and extracted by phosphate buffered saline, ethanol and acetonitrile solvents. The antifungal activities of the extracts have been evaluated using the well diffusion method in two concentrations of 1500 and 600 µg/well. The antifungal activity of extracts was observed in the gonad and test as well as spin (against one of fungi strains). The extracts of oral segments did not show any antifungal effects. Considering to the results, the gonad and test of the sea urchin are suggested for purification of effective compounds be prioritized for future studies.
    Keywords: Sea Urchin, Persian Gulf, Candida
  • Negin Derakhshesh, Abdolali Movahedinia, Negin Salamat, Mahmoud Hashemitabar, Vahid Bayati Pages 47-67
    In present study, two natural antioxidant enzyme, catalase and superoxide dismutase, activities were compared in different conditions, in vivo and in vitro models, and weights (100, 500 and 900 g) in grouper Epinephelus coioides. After wiping the fishes with, the liver was removed and digested by collagenase type 4. Then, the separated cells were cultured in Lebowitz (L-15) medium and incubated at 30°C for two weeks. In the next stage of the study, three grouper in each group were used. According to the results, a statistically significant difference was observed between two models (P˂0.05). A significant correlation was also observed in the activity of antioxidant enzymes among weight groups (P˂0.05). Taken together, according to the results, despite the significant differences between them it was concluded that the in vivo and in vitro models are so similar; therefore, cell culture can be utilized in biological studies of antioxidant enzymes in liver as an alternative method to in vivo model.
    Keywords: Catalase, Superoxide Dismotase, Primary Hepatocyte Cell Culture
  • Kaveh Noroozi, Mohammad Reza Kallbassi, Parvaneh Farzaneh, Seyed Abolhasan Shahzadeh Fazeli, Maryam Farghadan, Ahmad Nasimian, Mehrnaz Izadpanah, Sepideh Ashouri Movassagh, Shiva Mohammadi, Zahra Moradmand, Mansoureh Farhangnia Pages 69-88
    Cell lines provide an important biological tool for carrying out investigations into physiology studies and their applications are more growing every day. Here we tried to establish a cell line from Caspian salmon (Salmo trutta caspius). We used Caspian salmon fry and two primary culture methods, Explant and Enzymatic disaggregation were undertaken. Cell migration from pectoral, dorsal, caudal and anal fins was studied. Leibovitz’s L-15 with 20% FBS and 1% Pen-Strep was used as culture medium. Karyotyping was conducted to characterization of established cell line. Consequently cells were freezed with DMSO and stored at -196˚C. Explant Efficiency was showed that the best fin for explant is pectoral fin with the average of 71.31%. In comparison between two primary culture methods, enzymatic disaggregation with trypsin was more efficient. Chromosome counts were suggested 2n=80 and viability was 84.4% after one month storage in liquid nitrogen. Consequently, these cells have been subcultured, Freezed and defreezed over 22 times since their initiation and showed reasonable growth rate, therefor they can be used as cell lines in other studies. These cell lines can be reached at Iranian Biological Resource Center (IBRC) as the first aquactic animal cell strain with short names; CS2-1,CS2-2, CSe and IBRC C10190-3 catalogue numbers.
    Keywords: Caspian Salmon, Primary culture, Epithelial Cell Line
  • Khadijeh Khalifi, Negin Salamat, Abdolali Movahedinia, Amir Parviz Salati Pages 89-105
    One of the most important ecosystems of Persian Gulf which is severely affected by pollution is Mussa creek. The goal of this study was using gill pathological alterations to investigate effects of contaminants on Euryglossa orientalis in Musa creek. A number of 100 Euryglossa orientalis were collected from five sampling sites in Mussa creek including: Petrochemical, Gaafari, Magidieh, Ghazaleh and Zangi and gill samples were studied based on the routine histological methods. The most pathological changes observed in the fish gill were hypertrophy and hyperplasia of the lamellar epithelial cells, tlangictasia and congestion in blood vessels, oedema, lamellar fusion, lamellar disorganization and epithelial lifting. Degree of tissue changes of gill in E. orientalis in stations followed the pattern of Petrochemical≥ Magidieh> Ghazaleh> Gaafari> Zangi. The results showed that the gill pathological alternations in E. orientalis have direct relation with the amount of pollution in different stations of Mussa creek.
    Keywords: Persian Gulf, Environmental pollution, Histopathology, Euryglossa orientalis