فهرست مطالب

میکروبیولوژی کاربردی در صنایع غذایی - سال سوم شماره 3 (پاییز 1396)

مجله میکروبیولوژی کاربردی در صنایع غذایی
سال سوم شماره 3 (پاییز 1396)

  • تاریخ انتشار: 1396/09/30
  • تعداد عناوین: 6
|
  • فریده طباطبایی یزدی *، بهروز بهبهانی، علیرضا وسیعی، سحر روشنک، علی مرتضوی صفحه 1
    در این پژوهش فعالیت ضد میکروبی اسانس گلپر بر استافیلوکوکوس اورئوساشرشیا کلیسودوموناسائروژینوزا و کاندیدا آلبیکانس به روش های دیسک دیفیوژن، انتشار در چاهک، حداقل غلظت مهارکنندگی و حداقل غلظت کشندگی تعیین شد. فعالیت آنتی اکسیدانی و فنل کل اسانس به ترتیب با روش های میزان مهار رادیکال های آزادو فولین سیوکالچواندازه گیری شدند. پوشش ضد میکروبی موسیلاژ دانه بارهنگ کبیر همراه با غلظت های صفر، 1، 5/1 و 2 درصد اسانس گلپر ایرانی تولید شد. آزمون های میکروبی ) شمارش کل باکتری های زنده، سرمادوست ها، کپک و مخمر، اشریشیا کلی و استافیلوکوکوس اورئوس)، آزمون های شیمیایی ) تیوباربیوتیک اسید،عدد پراکسیدو pH) و ارزیابی حسی (رنگ، بو، پذیرش کلی) بر نمونه های گوشت گاو نگهداری شده در دمای یخچال (C4) در روزهای (صفر، 3، 6، 9، 12 و 15) انجام پذیرفت. دامنه حداقل غلظت مهارکنندگی اسانس گلپر بر میکروارگانیسم های موردمطالعه بین mg/ml5/0 تا 4 بود. فنل کل و فعالیت آنتی اکسیدانی (IC50) اسانس گلپر به ترتیبmg GAE/g 50/9و mg/ml20/110/8بود. براساس آزمون های میکروبیولوژی زمان ماندگاری نمونه پوشش داده شده با موسیلاژ بارهنگ کبیر (فاقد اسانس) و نمونه های حاوی غلظت های 1، 5/1 و 2 درصد اسانس گلپر نسبت به نمونه کنترل به ترتیب 3، 3، 6 و 9 افزایش یافت. به طورکلی پوشش ضد میکروبی موسیلاژ دانه بارهنگ کبیر حاوی اسانس گلپر به خوبی توانست زمان ماندگاری گوشت گاو را در دمای یخچال افزایش دهد.
    کلیدواژگان: بارهنگ کبیر، پوشش خوراکی، فعالیت ضد میکروبی، گلپر
  • مرمر یزدانی، اردشیر حسام پور * صفحه 22
    امروزه با پیشرفت علم بیوتکنولوژی و روش های مولکولیبه منظور بررسی ارگانیسم های موجود در فرآورده های غذاییاز DNAمارکرها و واکنش زنجیره ای پلیمراز[1]PCR) استفاده می شود.ازآنجایی که کیفیتDNAبرای تمامی آنالیزهای ژنتیکی که بر روی مارکرهای مولکولی پایه ریزی شده باشد اهمیت زیادی دارد، روش استخراج DNAژنومی باکیفیت بالا حائز اهمیت است. در بیشتر روش های استخراجDNA ژنومی سه نکته اساسی مدنظر است که شامل کیفیت DNAاستخراج شده، سرعت روش و میزان محصول آن می باشد.در این مطالعه6 روش برای استخراجDNAاز فرآورده های گوجه فرنگی به منظور مطالعه تقلبات غذایی و بررسی حضور گوجه فرنگی دست ورزی ژنتیکی شده (GMO)، استفاده شد و درنهایت پس از انتخاب مناسب ترین روش، نمونه DNAژنومی جهت بررسی توسط پرایمرهای اختصاصی ناحیه D-loopمیتوکندریایی مورد استفاده قرار گرفت.
    نتایج
    در این مطالعه پس از بررسی های کمی و کیفی از طریق الکتروفورز و استفاده از دستگاه نانودراپ مشخص شد که از بین روش های استخراج DNAژنومی بررسی شده،روش Wizardبر پایه اتصال اختصاصیDNAبه غشاهای سیلیکایی (ستون)برای استخراج DNAرب گوجه فرنگی مناسب ترین است. پس از استخراج DNAاز رب گوجه فرنگی، قطعه مارکر 280 جفت بازی از ناحیهD-Loop میتوکندریایی گوجه فرنگیبا استفاده از جفت آغازگرهای اختصاصی گوجه فرنگی طی واکنش زنجیره ای پلیمراز به طور اختصاصی تکثیر شد و نتایج نشان داد کهDNA رب گوجه فرنگی قابل تکثیر با آغازگرهای اختصاصی گوجه فرنگی می باشدنتایج مطالعه انجام شده نشان داد می توان انواع نمونه های گوجه فرنگی را قبل و بعد از فرآوری از جهت بررسی تقلبات غذایی در رب گوجه فرنگی و حضور گوجه ترانس ژنتیک در مواد غذایی ترکیبی و فراوری شده موردبررسی قرارداد.
    کلیدواژگان: استخراج DNAژنومی، فرآورده های گوجه فرنگی، DNA مارکرD، Loopمیتوکندریایی
  • ستاره بهزادی، غلامعلی مرادلی* صفحه 32
    سویه های اشریشیاکلی انتروهموراژیک می توانند انسان را از طریق مصرف غذاهای حیوانی و گیاهی، آلوده نمایند و عامل ایجاد عفونت های غذایی همراه با اسهال، کولیت هموراژیک، سندروم اورمی همولیت، ترومبوساتوپنیک و حتی مرگ باشند.
    هدف از این پژوهش، جداسازی و شناسایی ژن های بیماری زای سویه های اشریشیاکلیO157از نمونه های سبزیجات خشک می باشد.این پژوهش به صورت مقطعی-تصادفی برروی 112 نمونه سبزی خشک گوناگون جمع آوری شده از فروشگاه های عرضه کننده و عطاری های شهرستان ساوه انجام شد.جهت تشخیص وجود اشریشیاکلیاز آزمون های بیوشیمیایی و محیط کشت های افتراقی، در 112 نمونه انجام شد. جهت تشخیص سروتیپ O157، از آنتی سرم اختصاصی O157استفاده و وجود ژن های بیماری زای hlyو eae Aبا استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلیمراز چندگانه بررسی شد.63 نمونه از 112 نمونه موردبررسی، دارایاشریشیاکلی و20نمونه حاوی سروتیپ O157بودند.درنهایت در 2 نمونه ژن حدت eae Aو در 1 نمونه ژن حدت hlyشناسایی شد.ازآنجایی که اشریشیاکلی انتروهموراژیک O157H7یکی از نگرانی های اساسی بهداشت مواد غذایی محسوب می گردد، بایستی موردتوجه دائمی قرار گیرد. مطالعات گسترده تر بر روی منابع، میزان شیوع، سرنوشت و انتقال اشریشیاکلی O157H7در نزدیکی محیط های تامین سبزیجات، به منظور تعیین مکانیسم های آلودگی قبل از برداشت محصول و هم چنین پس از برداشت، خشک کردن و بسته بندی آن، توانایی انتقال آلودگی و بیماری زایی برای انسان ضروری است.
    کلیدواژگان: اشریشیاکلی، سبزیجات خشکO157، hly، eae A
  • مریم قبادی دانا *، هدی نظرلطفی صفحه 40
    از آنجایی که فرم ایزومری L(+)اسیدلاکتیک برخلاف ایزومر D(-)در بدن تجزیه میشود، در این تحقیق کوکسی های بومی جداسازی شده از فرآورده های لبنی سنتی استانهای کرمانشاه، ایلام، لرستان و کردستان ازنظر میزان تولید L(+)اسیدلاکتیک غربالگری شدند. در مرحله اول، غربالگری 63 سویه کوکسی ازنظر میزان تولید اسیدلاکتیک به روش تیتراسیون انجام شد. در مرحله دوم از میان سویه های برتر، سویه های برتر نهایی به روش آنزیمی انتخاب شدندکه مورد شناسایی بیوشیمیایی قرار گرفتند، سپس DNAسویه های برترنهایی استخراج شده و ژن srRNA16آن هاتکثیر شد و پس از تعیین توالی، در مقایسه با اطلاعات موجود در بانک ژنومی، هویت سویه ها مشخص شد. تنوع میزان تولید اسیدلاکتیک در میان سویه های کوکسی بومی موردبررسی به میزان قابل ملاحظه ای مشاهده شد. در مرحله اول، 7 سویه با تولید mg/g 25/27-24 اسیدلاکتیکانتخاب شدند. میزان تولیدL(+) اسیدلاکتیک در سویه های برتر انتخاب شده از روش آنزیمی به ترتیب mg/g 35/3، 05/3و 97/2 گزارش شد. دوسویه برتر، انتروکوکوس فسیوم[1]و دیگریاستافیلوکوکوس پاستوری[2]شناسایی شدند.ژن SrRNA16سویه های برتر در مرکز ملی اطلاعات بیوتکنولوژی آمریکا[3]به شماره های دسترسی508199KJو 508200KJ و 735653KFگزارش شد.سویه های انتخاب شده در تحقیق حاضر می توانند پس از بهینه سازی در صنایع مرتبط مورداستفاده قرار گیرند.
    کلیدواژگان: اسیدلاکتیک)L+غربالگری، کوکسی، میکروبیولوژی، PCR
  • مهرناز شانه چیان، ناصر تاج آبادی *، لیلا ناطقی صفحه 53
    در این پژوهش پروبیوتیک های لاکتوباسیلوسکانکئی و انتروکوکوسفاسیوم جداسازی شده از عسل مورد آزمونهای تشخیصی شامل مقاومت به اسید، مقاومت به نمک هایصفراوی (بایل)، مقاومت به شیره معده (پپسین و تریپسین)، عدم فعالیت همولیتیک، هیدرولیزال –آرژنین قرار گرفت و در نهایت جمعیت آنها شمارش شد. سپس آب سیب طبیعی با درجه بریکس 22 و آب انگور با درجه بریکس 15 توسط باکتری های پروبیوتیک با مقادیر cfu/ml810 به صورت 100 درصد از هریک از باکتری ها و همچنین مخلوط 50 درصد از هرکدام از باکتری ها تلقیح گردید. ارزیابی pH، ارزیابی درصد مواد جامد محلول (بریکس)و ارزیابی قابلیت زنده مانی باکتری های پروبیوتیک، در بازه های زمانی روز صفرم، روز هفتم،روز چهاردهم ، روز بیست و یکم انجام شد. نتایج نشان داد اختلافات معنی داری بین خصوصیات اسیدیته و pHتیمارها وجود دارد. با افزایش مدت زمان نگهداری و افزایش جمعیت پروبیوتیک، سطح pHو بریکس به طور معنی داری کاهش یافت (05/0>p). میزان بقای پروبیوتیک در طی زمان نگهداری در تیمار آب سیب دارای مخلوط 50 درصد لاکتوباسیلوس کانکئی و 50 درصدانتروکوکوس فاسیوم در انتهای روز بیست و یکم نگهداری دارای بالاترین میزان جمعیت در بین تیمارها بود. تیمار آب انگور دارای سویه های 100 درصد از هریک از باکتری ها نیز دارای حداقل جمعیت باکتری های پروبیوتیک بود (05/0>p). بر اساس نتایج به دست آمده تیمار دارای جمعیت cfu/ml108از مخلوط 50 درصد لاکتوباسیلوس کانکئی و انتروکوکوسفاسیوم به عنوان تیمار بهینه با کاهش دو سیکل لگاریتمی در انتهای دوره نگهداری بیست و یک روز انتخاب شد (05/0>p
    کلیدواژگان: آب انگور پروبیوتیک، آب سیب پروبیوتیک، انتروکوکوسفاسیوم، زنبور عسل، عسل، لاکتوباسیلوس کانکئی
  • مجتبی رجبیان، مجتبی بنیادیان *، مریم عباس والی، علی خنجری صفحه 65
    با توجه به عوارض جانبی نگه دارنده های شیمیایی و افزایش تمایل مصرف کنندگان به استفاده از ترکیبات گیاهی و طبیعی امروزه استفاده از اسانس ها به عنوان نگه دارنده مواد غذایی موردپژوهش های فراوان قرارگرفته است.در این مطالعه به بررسی ترکیبات موجود در اسانس های کاکوتی کوهی و آویشن دنایی و خصوصیات ضد باکتریایی آن ها علیه باکتری های غذازاد پرداخته شد. شناساییترکیباتاسانس هایکاکوتی کوهی و آویشن دناییتوسطتزریق نمونه به دستگاه GC/MSانجام شد.جهت ارزیابی حداقل غلظت بازدارندگی (MIC)اسانس ها، از روش میکرودایلوشن در پلیت های 96 خانه استفاده گردید. با توجه به نتایج حاصل از MIC، حداقل غلظت باکتری کشی (MBC)اسانس ها تعیین گردید. تمامی آزمایش ها 3 بار تکرار و میانگین داده ها به عنوان نتایج MBCو MICتعیین شدآنالیز آماری به وسیله نرم افزار SPSSویرایش 22 انجام گرفت. از بین ترکیبات شناسایی شده اسانس کاکوتی کوهی، تیمول (25/34 درصد)، پولگون (41/14 درصد)، کارواکرول (91/10 درصد)، و در اسانس آویشن دنایی کارواکرول (20/37 درصد)و اکتا دسنوئیک اسید متیل استر (67/21 درصد) بالاترین مقداررابه خود اختصاص دادند.نتایج این تحقیق نشان داد که حداقل غلظت بازدارندگی اسانس آویشن دنایی بین 61/0 تا mg/ml25/1 و در مورد اسانس کاکوتی کوهی بین 31/0 تا mg/ml25/1 می باشد. به طورکلی قدرت ضد باکتریایی اسانس آویشن دنایی بیشتر از اسانس کاکوتی کوهی بود وحساسیت باکتری های گرم مثبت در هر دو اسانس بیشتر از باکتری های گرم منفی ارزیابی شد (05/0P
    کلیدواژگان: اسانس، کاکوتی کوهی، آویشن دنایی، حداقل غلظت بازدارندگی، خصوصیات ضد میکروبی
|
  • Farideh Tabatabaei Yazdi *, Behrooz Alizadeh Behbahani, Alireza Vasiee, Sahar Roshanak, Ali Mortazavi Page 1
    In this study, the antimicrobial effect of HPEO was evaluated on Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, and Candida albicans through the methods of disk diffusion agar, well diffusion agar, minimum inhibitory concentration (micro dilution broth), and minimum bactericidal/fungicidal concentration. Antioxidant potential and total phenolic content were examined through the method of 2,2-diphenyl-1picrylhydrazyl (DPPH) and Folin-Ciocalteu method, respectively. Plantago major seed mucilage (PMSM) edible coatings were prepared at four different concentrations of the HPEO, including 0, 1, 1.5 and 2 percent. The control and the coated beef samples were analyzed periodically for microbiological (total viable count, psychrotrophic bacteria, Escherichia coli, Staphylococcus aureus and fungi), chemical changes (thiobarbituric acid, peroxide value and pH) and sensory attributes (color, odor and total acceptability) of the beef slices coated with pure PMSM at 4°C for 15 days (0, 3, 6, 9, 12 and 15). The minimum inhibitory concentration of the HPEO varied from 0. 5 mg/ml to 4 mg/ml. The total phenolic content (TPC) and antioxidant power were equal to 9.50 mg GAE/g and 57.25 ± 0.2 mg/ml, respectively. PMSM extended the microbial shelf life of beef by 3 days, whereas the PMSM incorporated with (1, 1.5 and 2) HPEO resulted in a significant shelf life extension of the beef by 3, 6 and 9 days, respectively, as compared to the control samples. Thus, PMSM containing HPEO could be used as an active packaging to maintain quality and extend the shelf life of the beef at 4◦C.
    Keywords: Edible coating, Plantago major, Heracleum persicum, Antimicrobial effect
  • Mamar Yazdani, Ardeshir Hesampour * Page 22
    Based on today biotechnology and molecular biology studies for investigation of organism presence in food products through evaluation of DNA markers by PCR method, the quality of extracted DNA for analysis of DNA markers is and important criteria and development of a DNA extraction method with high quality is ideal. In variant DNA extraction methods, three parameters are in high demand, quality, speed and quantity of isolated DNA. In current study, six variant DNA extraction methods were developed to analyze food product samples to investigate presence of GMO (Genetic Modified Organism) and food adulteration. The isolated DNA with high quality was analyzed by PCR technique through using specific primers of mitochondrial D-loop marker as a reaction template.The results showed that between six developed methods, the Wizard method which was based on the specific binding of DNA molecule to silica membrane (Column) was selected and amplification of D-loop DNA marker with band size of 280bp was successfully developed. Analysis of variant genomic DNA extraction methods and development of simplex PCR for specific amplification of tomato-loop DNA marker revealed that through using molecular biology method we can extract and detect specifically presence of low or residual amount of wild , GMO or adulteration tomato food with high sensitivity and quality.
    Keywords: Tomato Paste, DNA Marker, DNA Extraction method, PCR
  • Setareh Behzadi, Gholamali Moradli * Page 32
    Enterohaemorrhagic Escherchia coli strains can infect human beings through consuming animal and plant foods and cause foodborne infections along with diarrhea, hemorrhagic colitis, haemolytic-uraemic syndrome, thrombocytopenic purpura and even death. The present study aims to isolate and identify the pathogenic genes of Escherchia coli O157 strains from dried vegetables samples. This cross-sectional random study was carried out on 112 different dried vegetables samples collected from the herbal stores in Saveh. Biochemical tests and differential culture mediums were used for 112 samples to detect the presence of Escherchia coli. To detect serotype O157, the special antiserum O157 was used and the presence of the pathogenic genes hly and eae A was investigated using multiple polymerase chain reaction method. E. coli was found in 63 samples of 112 investigated samples and 20 samples contained serotype O157. Finally, gene eae A was detected in 2 samples and gene hly was detected in 1 sample. Since enterohaemorrhagic Escherchia coli O157: H7 is regarded as one of the main concerns of food health, it should be considered permanently. More extensive studies are needed on the sources, prevalence, fate and transmission of Escherchia coli O157: H7 near the environments supplying vegetables in order to determine the mechanisms of contamination before and also after harvesting, drying and packaging, and the ability to transfer contamination and pathogens to human.
    Keywords: dried vegetables, eae A, Escherchia coli, hly, O157
  • Maryam Ghobadi Dana *, Hodanazarlotfi Page 40
    Since L() lactic acid is catalyzed in the body, this compound is used in food, medicine and pharmaceutical industries. Several microorganisms are involved in the production of L() lactic acid. In this study Cocci were screened for production of L() lactic acid. In the first stage, 63 strains of cocci were screened for production of lactic acid by titration method. In the second stage, through superior strains of the first stage, final superior strains were selected by enzymatic method. These strains produce L()lactic acid purely that have identified by hydrocarbons fermentation. Then DNA extraction and amplification of the gene 16SrRNA of them was performed. After sequencing of PCR products and comparing them with the existing data in the database of NCBI, final superior strains were identified. The rates of Lactic acid production by local strains were observed very different. In the First stage, seven strains with 24-27.25 mg/g lactic acid production were selected and were evaluated by enzymatic method. Strains that produced 3.35, 3.05, 2.97 mg/g L() lactic acid were reported as superior strains. One Superior strains was identified as Staphylococcus pasteuri and others were identified as Enterococcus faecium. The sequences of 16SrRNA of superior strains were registered in National center for Biotechnology Information (NCBI) with accession numbers, Kj508199, Kj508200 and Kf735653. Superior strains are suitable for production of pure L() lactic acid so they could introduce to related industries after optimization process.
    Keywords: L(+) lactic acid, Microbiology, PCR, screening, cocci
  • Mehrnaz Shanehchian, Naser Tajabadi*, Leyla Nateghi Page 53
    In this study the probiotics of Enterococcus faecium and Lactobacillus kunkeei were isolated from honey tested for resistance to acid, resistance to bile salts (bile), resistance to gastric juice (pepsin and trypsin), lack of hemolytic activity Hydrayzol – arginine and finally enumerated the population. Then the apple juice with 22 Brix and grape juice with 15 Brix inoculated with 100 percent of each bacterium or mixed form 50 percent of each bacterium. Evaluation of acidity, pH, soluble solids assessment (Brix), assess the viability of probiotic bacteria in zero-day intervals, the seventh day, the fourteenth day, the twenty-first day was done. The results showed that there was significant difference between properties of acidity and pH. The pH and Brix significantly decreased with increasing the storage time and the population of probiotics (p
    Keywords: Probiotic grape juice, Probiotic apple juice, Enterococcus faecium, Honey bee, Honey, Lactobacillus kunkeei
  • Mojtaba Rajabian, Mojtaba Bonyadian*, Maryam Abbasvali, Ali Khanjari Page 65
    Due to the side effects of chemical preservatives and the increasing consumer's demand for herbal and natural compounds, the use of essential oils as a food preservative have been widely studied. The aim of the present study was to investigate the chemical compound of Ziziphora cliniopodiodes and Thymus daenensis essential oils and their antibacterial properties against some food borne pathogenic bacteria. The eessential oils were analysed by gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) .A microdilution method in 96-well plate was used to evaluate the minimum inhibitory concentration (MIC) of essential oils. According to the results of MIC, the evaluation of minimum bactericidal concentration (MBC) of essential oils were determined. All experiments were done triplicate and average of data were determines as results of MBC and MIC. Statistical analysis conducted by SPSS software edition 22. Among the detected compounds, Ziziphora clinipodiodes essential oils by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC/MS), Thymole (34.25percent) Pulegoneand (14.41percent), Carvacrol (10.91percent) and in Thymus daenesis, Carvacrol (37.20percent) and octadecenuec acid methyl ester (21.67percent) were dedicated the highest values. The results of this research revealed that minimum inhibitory concentratin of ziziphora clinipodiodes essential oils and Thymus daenesis were 0.61-1.25 and 0.31-1.25 mg/ml, respectively. Generally, antibacterial effect of ziziphora clinipodiodes were greater than Thymus daenesis. In addition, sensitivity of gram positive bacteria in both essential oils were evaluated higher than gram negative bacteria.
    Keywords: Ziziphora clinopodioides, Thymus daenensis, essential oils, Minimum inhibitory concentration, Antibacterial effect