فهرست مطالب

نشریه پژوهش هایی در کشت سلول و بافت کاریوتیک
سال یکم شماره 3 (زمستان 1399)

  • تاریخ انتشار: 1399/12/01
  • تعداد عناوین: 7
|
  • زهرا اوراقی اردبیلی صفحه 0
  • مریم بی خوف تربتی*، مسعود شعبانزاده، مهزاد مطلبی صفحات 1-7
    پیشینه مطالعه و هدف

    نانو حامل های دارویی به دلیل دارا بودن خواص مهمی مانند انتقال هدفمند دارو، افزایش حلالیت داروهای نامحلول و کاهش اثرات سمی داروها بر بافت های سالم کاربرد فراوانی در درمان سرطان دارند. هدف از این مطالعه، بررسی اثرات نانوکپسول حاوی تاموکسیفن بر بیان ژن های پیش برنده آپوپتوز Bax و Bakدر رده سلولی MCF-7 می باشد.

    روش مطالعه

    در این مطالعه ساختار نانوکپسول توسط طیف سنجی FTIR تایید گردید و اثرات نانوکپسول های تاموکسیفن بر فعالیت زیستی سلول ها توسط MTT assay در غلظت های 5، 10، 50، 100 و 200 میکروگرم بر میلی لیتر پس از 48 ساعت سنجیده شد. روش Real time PCR، برای ارزیابی میزان بیان ژن های Bax و Bak مورد استفاده قرار گرفت و تجزیه و تحلیل های آماری توسط نرم افزارSPSS 23.0 انجام گرفت.

    نتایج

    براساس نتایج روش MTT، غلظت های بیشتر نانوکپسول های تاموکسیفن بصورت وابسته به غلظت توان زیستی سلول ها را کاهش داده و بیشترین میزان سمیت نانوکپسول ها در غلظت 200 میکروگرم در میلی لیتر بوده است. همچنین بیان ژن های Bax و Bak در سلول های MCF-7 تیمار شده پس از 48 ساعت نشان دهنده القا آپوپتوز در این سلول ها بودد. نتایج حاصل نشان دهنده افزایش 8/1 برابری سمیت سلولی نانوکپسول های تاموکسیفن در مقایسه با تاموکسیفن آزاد می باشد.

    نتیجه گیری

    با توجه به القا آپوپتوز در نتیجه افزایش بیان ژن های Bax و Bak و نیز افزایش سمیت سلولی نانوکپسول های حامل تاموکسیفن در مقایسه با تاموکسیفن آزاد، این نانو داروها می توانند کاندید مناسبی برای درمان سرطان سینه باشند.

    کلیدواژگان: تاموکسیفن، نانوکپسول ها، سلول هایBax، Bak، MCF-7
  • زینب کامرانی، معصومه حشمتی*، صادق باباشاه صفحات 8-15
    پیشینه مطالعه و هدف

    سیلیمارین، استخراج شده از گیاه خارمریم، غنی از فلاوولیگنان مانند سیلیبینین، سیلی دیانین و سیلی کریستین است و مطالعات متعددی در رابطه با اثرات ضد سرطانی آن صورت گرفته است. هدف از مطالعه حاضر بررسی اثرات سمیت سلولی و القاء آپاپتوز ناشی از سیلیمارین بر روی رده سلولی سرطان کولون SW480 و نرمال HEK-293 می باشد.

    روش مطالعه

    در مطالعه حاضر اثرات سمیت سلولی و القاء آپاپتوز ناشی از سیلیمارین بر روی رده سلولی سرطان کولون SW480 و نرمال HEK-293 با روش هایی مانند رنگ آمیزی تریپان بلو، آزمون MTT، AnexinV/PI و بیان ژن های BAX و BCL2 با تکنیک q-PCR بررسی شد.

    نتایج

    نتایج حاصل از آزمون تریپان بلو و MTT گویای اثرات القاء سمیت سلولی وابسته به زمان و غلظت در پی تیمار با سیلیمارین در رده سلولی SW480 می باشد و غلظت IC50 مشاهده شد. ولی در تیمار سلول های نرمال با سیلیمارین غلظت IC50 مشاهده نشد. همچنین افزایش القا آپاپتوز در رده سلولی سرطانی SW480 در گروه های تیمار شده با سیلیمارین در غلظت های µg/ml 50 و 100 و افزایش نسبت بیان ژن های BAX/BCL2 در مقایسه با گروه کنترل منفی مشاهده شد.

    نتیجه گیری

    با توجه به نتایج حاصل از مطالعه حاضر سیلیمارین به عنوان یک فاکتور القاء کننده سمیت و آپاپتوز سلولی در رده سلول سرطانی کولون بدون ایجاد سمیت سلولی بر روی رده سلولی نرمال نقش دارد و می تواند به عنوان یک مکمل جهت درمان موثر سرطان کولون پیشنهاد گردد.

    کلیدواژگان: سیلیمارین، سمیت سلولی، اپوپتوز، سرطان کولون
  • فلورا فروزش*، پانته آ حاجی میرزا شفیع سلطانی، مهسا قیاقی، مهدی شعبانی صفحات 16-24
    پیشینه مطالعه و هدف

    سرطان کولورکتال یکی از شایع ترین سرطان ها است و تغییرات اپی ژنتیکی به عنوان هدف درمانی مورد توجه قرار گرفته است. سدیم بوتیرات با هایپر-استیلاسیون اجزا کروماتین قادر به تغییر در بیان ژن ها است. هدف از این مطالعه بررسی تاثیر سدیم بوتیرات بر روی بیان ژن های Bax و Bcl-2 می باشد.

    روش مطالعه

    رده سلولی Caco-2 با غلظت های مختلف سدیم بوتیرات (25 الی 150 میلی مولار) براساس غلظت IC50 در دو بازه زمانی 24 ساعت و 48 ساعت تیمار شد. بیان ژن های Bax و Bcl-2 توسط تکنیک qReal-Time PCR به روش ΔΔCT -2 اندازه گیری و نسبت Bcl-2/Bax مورد ارزیابی قرار گرفت.

    نتایج

    نتایج نشان داد سدیم بوتیرات باعث افزایش بیان ژن Bax و کاهش بیان ژن Bcl2 در سلول های تحت تیمار در مقایسه با گروه کنترل شد که از نظر آماری معنی دار می باشد (p <0.05). غلظت 25 میلی مولار در بازه زمانی 48 ساعت تیمار موثرترین دوز انتخاب گردید. همچنین نسبت Bcl-2/Bax در همین غلظت کاهش معنی داری را نشان داد.

    نتیجه گیری

    سدیم بوتیرات با کاهش نسبت بیان Bcl-2/Bax باعث القا آپوپتوز در سلول های سرطانی می شود. این ماده می تواند به عنوان هدف درمانی استفاده شود ولی نیاز به بررسی بیشتر می باشد.

    کلیدواژگان: سرطان کولورکتال، سدیم بوتیرات، رده سلولی Caco-2، BAX، BCL-2
  • کاظم پریور*، شاهین شکیبا، آزاده حکمت صفحات 25-32
    پیشینه مطالعه و هدف

    گسترش استفاده از تلفن همراه، از مهم ترین عوامل خطرآفرین سلامتی انسان در عصر تکنولوژی است. هدف از این مطالعه، بررسی اثرامواج 4G تلفن همراه در مدت 30 روز بر موش های نر نژاد NMRI و بررسی میزان اسپاماتوژنز در آنها می باشد.

    روش مطالعه

    در این تحقیق تجربی، 3 گروه موش نژاد NMRI وجود داشت: گروه کنترل (بدون قرارگیری در معرض امواج 4G تلفن همراه در مدت 30 روز)، گروه شم (قرارگیری در معرض امواج 4G تلفن همراه در مدت 30 روز بدون مکالمه مداوم) و گروه تجربی (قرارگیری در معرض امواج 4G تلفن همراه (SAR 0.482 وات بر کیلوگرم و فرکانس 1800 مگاهرتز) در مدت 30 روز با مکالمه مداوم). پس از دوره 30 روزه موش ها تشریح شده و بیضه و اپیدیدیم آنها جدا گردید و جهت بررسی نهایی بعد از طی مراحل آماده سازی با میکروسکوپ مشاهده گردید.

    نتایج

    نتایج نشان داد که قرارگیری در معرض امواج 4G تلفن همراه در مدت 30 روز با مکالمه مداوم موجب کاهش معنی دار میزان تعداد اسپرم ها و تعداد سلول های لیدینگ می شود (p <0.001). اما تعداد سپرماتوگونی ها تغییر شاخصی را نشان نداد. همچنین مطالعه میکروگراف های بافت بیضه و اپیدیدیم نشانگر تغییرات در این دو بافت بود. قطر بیضه ها کاهش یافت (p <0.001) اما وزن بیضه ها تغییر شاخصی را نشان نداد.

    نتیجه گیری

    نتایج نشان داد که قرارگیری در معرض امواج 4G تلفن همراه در مدت 30 روز با مکالمه مداوم موجب کاهش میزان اسپرم می گردد. نتایج این مطالعه تاثیر امواج الکترومغناطیس تلفن های همراه را بر میزان باروری مردان نشان می دهد.

    کلیدواژگان: امواج الکترومغناطیس، نسل چهارم امواج تلفن همراه (4G)، اسپرماتوژنز، بیضه، اسپرم
|
  • Zahra Oraghi Ardebili Page 0
  • Maryam Bikhof Torbati *, Masoud Shaabanzadeh, Mahzad Motallebi Pages 1-7
    Introduction and Aim

    Drug nanocarriers have been used extensively in cancer therapy due to their features like the ability to targeting drug transmission, increasing drug solubility, and reducing the drug cytotoxic effects on healthy tissues. The purpose of this study was to investigate the effects of Tamoxifen nanocapsules on the expression of Bax and Bak genes in MCF-7 cell lines.

    Methods

    In this study, the nanocapsule structure was confirmed by FTIR spectroscopy and the effects of Tamoxifen nanocapsules on cell bioactivity were evaluated by MTT assay at concentrations of 10, 50, 100, and 200 µg/mL after 48 hours. Real-time PCR was used to analyze the expression of Bax and Bak genes and data were analyzed using SPSS (23.0) software.

    Results

    According to the MTT assay, higher concentrations of Tamoxifen nanocapsules decreased cell bioactivity in a dose-dependent manner and the highest toxicity of nanocapsules was at the concentration of 200 µg/mL. The expression level of Bax and Bak genes in MCF-7 treated cells after 48 hours indicated the induction of apoptosis in cells. The results revealed a 1.8-fold increase in cytotoxicity of Tamoxifen nanocapsules compared to free Tamoxifen.

    Conclusion

    The apoptosis induction as a result of increased expression of Bax and Bak genes and enhanced cytotoxicity, makes Tamoxifen nanocapsules a promising treatment for breast cancer therapy compared to free Tamoxifen.

    Keywords: Tamoxifen, Nanocapsules, BAX, Bak, MCF-7 cells
  • Zainab Kamrani, Masoumeh Heshmati *, Sadegh Babashah Pages 8-15
    Introduction and Aim

    Silymarin, extracted from the milk thistle, is rich in flavolignans such as silybinin, silidianin, and silycristine. Several studies have been done on its anticancer effect. This study aimed to evaluate the effects of cytotoxicity and induction of silymarin-induced apoptosis on colon cancer SW480 and normal HEK-293 cell lines.

    Methods

    In the present study, the effect of cytotoxicity and apoptosis induction by silymarin on colon cancer SW480 and Normal HEK-293 cell lines were investigated by different methods such as trypan blue staining, MTT assay, Annexin V/PI staining, and evaluating the expression level of BAX and BCL2 Genes by q-PCR technique.

    Results

    The results of the trypan blue staining and MTT assay indicated the cytotoxicity effects of silymarin in SW480 cells in a time-dependent manner. The IC50 was also evaluated. However, no cytotoxic effects were observed in HEK-293 cells after treatment with silymarin. Also, an increase of apoptosis in SW480 cells that were treated with 50 and 100 µg/mL silymarin was observed. An increase in BAX/BCL2 gene expression level was also observed in SW480 cells compared to HEK-293 cells.

    Conclusion

    According to the results of the present study, silymarin can induce toxicity and cell apoptosis in the colon cancer cell line without causing cytotoxicity in the normal cell line. So silymarin can be suggested for effective treatment of colon cancer.

    Keywords: Silymarin, Cytotoxicity, Apoptosis, colon cancer
  • Flora Forouzesh *, Pantea Hajimirza Shafiesoltani, Mahsa Ghiaghi, Mahdi Shabani Pages 16-24
    Introduction and Aim

    Colorectal cancer is one of the most common cancers. Epigenetic change has been considered by many scientists as a therapeutic target. Hyper acetylation of chromatin components by sodium butyrate can alter gene regulation. This study aims to investigate the effects of sodium butyrate on Bax and Bcl-2 gene expression.

    Methods

    Caco-2 cell line was treated with different concentrations of sodium butyrate (25 mM to 150 mM) based on IC50 concentration in two time periods of 24 hours and 48 hours. Bax and Bcl-2 gene expression were measured by qReal-Time PCR technique and Bcl2/Bax ratio was evaluated.

    Results

    The results showed that sodium butyrate increased the expression of Bax gene and decreased the expression of Bcl-2 gene in treated cells compared to the control group, which was statistically significant (p < /em> <0.05), and 25 mM was selected as the most effective dose after 48 hours of treatment. Also, the Bcl-2/Bax ratio at the same concentration showed a significant decrease

    Conclusion

    Sodium butyrate induces apoptosis in cancer cells by reducing the expression ratio of Bcl-2/Bax. It can be used as a therapeutic target but needs further investigation.

    Keywords: Colorectal Cancer, Sodium butyrate, Caco-2 cell line, BAX, Bcl2
  • Kazem Parivar *, Shahin Shakiba, Azadeh Hekmat Pages 25-32
    Introduction and Aim

    Widespread consumption of cell phones is the most crucial risk factor f human health in the age of technology. This study aimed to explore the effects of 4G mobile phone radiation on the level of spermatogenesis in male rats in 30 days.

    Methods

    In this laboratory experimental study, the male NMRI rats were divided into 3 groups: the control group (without exposure to 4G mobile phone for 30 days continuously), the sham group (exposure to 4G mobile phones, but no call within 30 days), and the experimental group (exposure to 4G cellular mobile (SAR=0.482 W/Kg, 1800 MHZ) during calls in progress for 30 days). All rats were sacrificed after 30 days and their organs (testicular and epididymis) were separated.

    Results

    The mean spermatid count and the mean leydig cells count was decreased significantly (p < 0.001) after exposure time. However, the mean count of spermatogonia was not changed, significantly. Also, the study of micrographs indicated the morphology of testis and epididymis changed. The testicular size changed (p < 0.001), however, the testicular weight was not changed, significantly.

    Conclusion

    The exposure of 4G mobile waves decreased spermatogenesis. Our results warrant further inquiries on the potential effects of electromagnetic field (EMF) from mobile phones on male fertility.

    Keywords: Electromagnetic field (EMF), Fourth generation of mobile phone standards (4G), Spermatogenesis, Testicular, Sperm
  • Hybert Keshishian, Shadi Habibnia, Mohamad Reza Fallahian, Saeed Zaker Bostanabad * Pages 33-39
    Introduction and aim

    The hepatitis B virus (HBV) was discovered in 1965. Approximately 350 million people are infected with HBV. The virus has a worldwide spread and one of the most important complications of infection is chronic hepatitis, cirrhosis, and hepatocellular carcinoma. Hepatitis can be detected by biochemical tests that determine liver function.

    Methods

    This study was qualitative and 30 patients with suspected hepatitis B referring to Massoud Lab in 2019 were selected. Blood samples were tested for HBsAg positive by multiplex RT-PCR with specific probes and primers as well as β-Actin gene as quality control. Then the obtained results were compared with the results of commercial tests.

    Results

    From 30 samples, 19 samples were HBsAg positive and 11 samples were HBsAg negative. Positive samples were re-examined to confirm the positive results. To compare and evaluate the quality of the results of the designed test, all of these 30 samples were analyzed using another common laboratory kit.

    Conclusion

    The high sensitivity, good reproducibility, and low cost make this innovative quantitative HBV real-time PCR assay especially well-suited for application to large clinical surveys.

    Keywords: β-Actin gene, HBV, Hepatitis B, Molecular Diagnosis, Real-time PCR
  • Ali Naseri *, Mostafa Noroozi Pages 40-45
    Introduction and aim

    Diatoms are small phototrophic organisms with an essential role in the food chain in terrestrial and aquatic environments. The purpose of the present study was to optimize and improve the methods for diatom sample preparations.

    Methods

    The difference between the improved method with the old ones is based on the 3-interval time of the supernatant collection. Also, the centrifuge is not necessary for this improved method.  

    Results

    The average number of cells in our proposed method was 338% higher than the other methods.

    Conclusion

    The preparation of specimen suspension and caution in a sampling of stations, is the most important factor for obtaining a maximum sample of diatoms.

    Keywords: Diatom, Improved method, Taleghan River