Medical Laboratory Journal
Volume:5 Issue: 2, 2012

مننژیت شایعترین عارضه عفونت با ویروس اوریون در کودکان است. تشخیص به موقع مننژیت کودکان در درمان و مدیریت بیماری اهمیت دارد. در این مطالعه مننژیت ناشی از ویروس اوریون در کودکان مراجعه کننده به مرکز آموزشی درمانی طالقانی گرگان بررسی شد.
در این بررسی توصیفی تحلیلی از کلیه کودکان زیر 10 سال که از تیرماه 1387 الی تیر 1389 به مرکز آموزشی درمانی کودکان طالقانی گرگان با علائم مننژیتمراجعه کردند نمونه مایع مغزی نخاعی گرفته شد. برای 40 نمونه بیمار که کشت باکتریایی آنها منفی بود، استخراج ژنوم ویروسی با Real-Time PCR استفاده از کیت انجام شد و سپس جستجوی ژنوم ویروس اوریون به روش وارد و با SPSS صورت گرفت. یافته های دموگرافیک، بالینی، آزمایشگاهی و مولکولی در نرم افزار 18 معنی دار در نظر گرفته شود. P< مورد آنالیزقرار گرفتو 0.05 X تست 2 7%) از نظر ویروس اوریون مثبت شدند که 2 مورد پسر و 1 مورد دختر / 3 بیمار(5 0 درجه و استفراغ مثبت داشته ولی فاقد فونتانل برآمده بودند. هر سه /5 - بودند. هر سه مورد مثبت، تب 1 بیمار فاقد علائم کرنیگ، برادزینسکی، سفتی گردن، هپاتواسپلنومگالی، لنفادنوپاتی، فارنژیت و راش در 2 مورد مثبت بود و از نظر پروتئین یکمورد CRP بالاتر از حد نرمال داشته و ESR بودند. همگی بالاتر از حد نرمال گزارششد.
از آنجا که مننژیت یکاورژانسپزشکی به شمار می رود جهت تشخیصسریع و درمان به موقع در موارد مننژیت آسپتیک، بهره گیری از تکنیکهای تشخیصی مولکولی پیشنهاد می گردد.

مشکلات ناشی از گسترش سویه های مایکوباکتریوم توبرکلوزیس مقاوم به چند دارو، شناسایی آنها را در هر منطقه ضروری نموده است. در این مطالعه فراوانی این سویه ها در استان گلستان در شمال ایران که یکی از کانون های اصلی سل در ایران می باشد مورد بررسی قرار گرفته است.

از نمونه بالینی 148 بیمار مراجعه کننده به آزمایشگاه مرکز سل دانشگاه علوم پزشکی گلستان طی سال های 1390-1388 با روش لوله های معرف رشد مایکوباکتریوم (MGIT Mycobacterium growth indicator tube) مایکوباکتریوم توبرکلوزیس جدا شد. تست حساسیت به ایزونیازید و ریفامپین در این محیط و مطابق دستورالعمل شرکت سازنده (Becton-Dickinson-USA) انجام شد. توزیع فراوانی مقاومت براساس خصوصیات دموگرافیک و نیز سرعت رشد باکتری بررسی و مقایسه آنها با تست های آماری χ2 و T test انجام شد و در تمامی موارد P کمتر از 05/0 معنی دار در نظر گرفته شد.

کشت 148 نمونه کلینیکی در MGIT مثبت بود، مدت زمان لازم برای رشد مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در MGIT از 2 تا 55 (میانگین 4/10± 3/16) روز متغیر بود و زمان لازم برای بررسی نتیجه مقاومت داروئی 3± 57/9 روز برآورد شد. مقاومت به ایزونیازید و ریفامپین در این مطالعه به ترتیب %6/17 و%4/3 تعیین گردید و از این تعداد، 5 نمونه (%4/3) MDR (Multidrug resistant) بودند (%6-1CI95%;). بین مقاومت به این داروها با عواملی مثل جنس، سن، نتیجه اسمیر نمونه بالینی، نوع نمونه بالینی و سابقه ابتلا قبلی ارتباط آماری معنی داری مشاهده نگردید و در تمام موارد 05/0 P>بود.

شیوع MDR در استان گلستان %4/3 است که درحد آمار کشوری است. با روش MGIT جداسازی و آنتی بیوگرام ایزوله های MDR بطور متوسط 26 روز طول کشید که می تواند باعث کوتاه تر شدن زمان تشخیص و مقاومت دارویی باسیل سل گردد.

شناسایی سویه های استرپتوکوکوس گروهA (استرپتوکوکوس پیوژنز) عمدتا برپایه روش های سرولوژیک، مبتنی برآنتی ژن های سطحی TوMبوده وبر این اساس سروتایپ های مختلفی از سراسر جهان گزارش شده است. بدنبال آن تعیین توالی انتهای آمینی ژن emm جایگزین روش های قدیمی تر شده و براین اساس بیش از150 تیپ emm در سراسر جهان شناخته شده است. هدف این مطالعه تعیین شیوع تیپ های emm دربین جدایه های حلقی حاصل از گلودرد های چرکی و همچنین الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی آنها درمناطق غربی استان مازندران طی سالهای 89-90 می باشد.
50 جدایه از حلق افراد مبتلا به گلودرد های چرکی مراجعه کننده به مراکز بیمارستانی مستقر در شمال ایران شامل بیمارستانهای شهید رجایی تنکابن، امام سجاد رامسر و طالقانی چالوس طی سالهای 89-90 به روش کشت در محیط آگار خوندار، آزمایش حساسیت به باسیتراسین، آزمون PYR و همچنین اگلوتیناسیون توسط آنتی سرم های اختصاصی شناسایی شدند. حساسیت آنتی بیوتیکی جدایه ها با استفاده از دیسک های خریداری شده از شرکت پادتن طب ایران، توسط روش کربی بائر و تجزیه وتحلیل آن بوسیله جدول استاندارد CLSI انجام گرفت. ارزیابی مکانیسم مقاومت به اریترومایسین توسط روش مضاعف دیسکی در حضور اریترومایسین و کلیندامایسین انجام شد. ژن emm همه جدایه ها تکثیر و محصولات PCR آنها توسط شرکت ماکروژن کره تعیین توالی شده و با استفاده از برنامه BLAST2.0 (مرکز ملی اطلاعات بیوتکنولوژی، قابل دسترسی در پایگاه WWW.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST)) توالی های ژنهای مورد نظر با توالی های منتشره در بانک ژنی، جهت تعیین تیپ emm مقایسه شدند.
4تیپ مختلف emm شناسایی شد. از میان آنها emm5 فراوانترین بوده(26 از 50 مورد، 52%) وبدنبال آن emm12 (12 مورد، 24%) و emm79 و emm86 با فراوانی یکسان (6مورد، 12%) حضور داشتند. همه آنتی بیوتیک های دارای حلقه بتا لاکتام اثر مهاری بر ایزوله ها نشان دادند، در صورتیکه 18% از جدایه ها (9) مقاوم به اریترومایسین بودند. شایع ترین فنوتیپ مقاوم cMLSB (%66.6) وبدنبال آن فنوتیپ M (%33.3) بوده، درحالیکه در هیچکدام از جدایه ها فنوتیپ iMLSB مشاهده نشد. 6 مورد از جدایه ها(%12) مقاوم به کلیندا مایسین بودند.
نتایج حاصل حضور متفاوتی ازتیپ های emm جدا شده ازموارد حلقی، نسبت به جدایه های سایر نقاط جهان نشان میدهد، وجود تیپ emm86 درفارنژیت که در گزارشات قبلی ذکر نشده است حائز اهمیت میباشد. وجود مقاومت آنتی بیوتیکی به اریترومایسین از یافته های ارزشمند این تحقیق می باشد.

سالمونلا یکی از عوامل مهم عفونت های روده ای و اسهال می باشد و عدم تشخیص صحیح باکتری ممکن است سبب شکست در درمان شود. هدف از این مطالعه بررسی و مقایسه PCR وکیت API-20E با تست های روتین بیوشیمیایی در تشخیص انواع سالمونلا ها می باشد.
در این تحقیق 470 نمونه کودک مبتلا به گاستروآنتریت حاد از 3 بیمارستان دانشگاهی امام، شریعتی و مرکز طبی کودکان در شهر تهران، جهت تشخیص سالمونلا، به آزمایشگاه میکروب شناسی دانشکده بهداست انتقال یافت. برای ارزیابی نتایج کشت روتین بیمارستانهای فوق، نمونه ها احیا و خالص سازی شد و از کیت API-20E برای شناسائی باکتری استفاده شد، همچنین بعد از استخراج DNA با روش جوشاندن، از روش PCR استفاده شد. برای مقایسه نتایج از تست مک نمار استفاده گردید. الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی تمام ایزوله های سالمونلا به روش دیسک دیفیوژن و طبق دستورالعمل Clinical and laboratory standard institute(CLSI) مورد بررسی قرار گرفت.
براساس نتایج ارائه شده از مراکز درمانی از 470 نمونه مورد بررسی 65 نمونه (8/13%) دارای سالمونلا بودند، در حالیکه در ارزیابی با روش کشت و کیت API-20E در بخش میکروب شناسی دانشکده بهداشت و روش PCR فراوانی موارد مثبت به ترتیب 37 نمونه (9/7%) و 39 نمونه (3/8%) براورد گردید. تفاوت مشاهده شده در شناسائی سالمونلا با روش های روتین بیمارستانی با نتایج کیت API و PCR از نظر آماری معنی داری می باشد(P<0.05). نتایج بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی روی 37 ایزوله سالمونلا از نمونه های اسهال نشان داده که 3/73% ایزوله ها حداقل به یکی از 16 آنتی بیوتیک مورد بررسی مقاومت نشان دادند. تمامی ایزوله ها به نیتروفورانتوئین مقاوم بوده و همگی آنها نسبت به سفالوسپورین های نسل سوم حساسیت نشان دادند.
نتایج نشان داد اختلاف معنی داری میان یافته های کشت و تعیین هویت در بیمارستان و نتایج تشخیص سالمونلا با روش کیت API-20E و PCR وجود دارد.

کاندیدا آلبیکنس یک قارچ فرصت طلب انسانی است که عامل عفونتهای مخاطی و سیتمیک در افراد با نقص سیستم ایمنی است و در سالیان اخیر افزایش مقاومت به عوامل ضد قارچی درآن دیده شده است، لذا تحقیق برای یافتن داروهای ضد قارچی با ترکیب جدید ضروری می باشد. برخی از گیاهان به دلیل دارا بودن پلی فنلها دارای خواص ضدمیکروبی هستند. در این تحقیق اثر ضد قارچی اسانس کارواکرول که ترکیب اصلی اسانس روغنی حاصل از آویشن می باشد، بر روی دو سویه های حساس و مقاوم به فلوکونازول کاندیدا آلبیکنس بررسی شد.
اثر مهاری اسانس کارواکرول بر روی سویه های کاندیدا آلبیکنس با استفاده از روش بررسی قطر هاله مهارکنندگی و حداقل غلظت مهارکنندگی با روش رقت سازی در محیط کشت مایع انجام شد. برای این منظور رقت های متوالی از اسانس کارواکرول در میکروپلیت های 96 خانه ایی تهیه و 10 میکرولیتر از سوسپانسون قارچی به آن اضافه شد. کدورت ایجاد شده در چاهک ها بعد از اتوگذاری با الیزا ریدر بررسی و کمترین غلظتی که از رشد ممانعت می نمود ثبت گردید. با کشت 10 میکرولیتر از چاهک های فاقد کدروت در محیط سابورو دکستروز آگار حداقل غلظت کشنده(MFC) اسانس و داروی فلوکونازول تعیین شد.
حداقل غلظت مهار کنندگی اسانس کارواکرول در سویه حساس و مقاوم به فلوکونازول کاندیدا آلبیکنس به ترتیب 3/5 و18/6 میکروگرم بر میلی لیتر و حداقل غلظت کشندگی آن ها 61/10و3/12 میکروگرم بر میلی لیتر بود. بالاترین قطر هاله مهاری در این دو سویه در حضور اسانس کارواکرول به ترتیب 45 و 35 میلی متر برای سویه حساس و مقاوم به فلوکونازول تعیین شد.
در این بررسی اسانس کارواکرول اثر ضد قارچی مناسبی علیه سویه حساس و مقاوم به فلوکونازول کاندیدا آلبیکنس از خود نشان داد. بررسی احتمال کاربرد این اسانس در درمان عفونت کاندیدائی نیاز به انجام مطالعات تکمیلی دارد.

صفرا در افراد سالم استریل و فاقد هر گونه باکتری می باشد و وجود میکرو ارگانیسم ها در صفرای انسان می تواند نشانه ای از وجود یک مشکل بالینی باشد که در اغلب موارد با بیماری کوله لیتیازیس (cholelithiasis) مرتبط است. هدف از مطالعه حاضر بررسی توزیع فراوانی باکتری های موجود در نمونه مجاری صفراوی بیماران مبتلا به سنگ های دستگاه صفراوی و بیماری های بدخیم دستگاه پانکراسی – صفراوی می باشد.
طی 6 ماهه دوم سال1390، 102 نمونه مایع صفراوی به روش اندوسکوپیک کولانژیوپانکراتوگرافی معکوس(ERCP) از بیماران مراجعه کننده به بیمارستان طالقانی دانشگاه علوم پزشکی شهید بهشتی جمع آوری گردید. ابتدا اطلاعات بالینی بیماران، نوع سنگ و بیماری های زمینه ای مورد بررسی قرار گرفت، در ادامه بررسی های میکروب شناسی مانند کشت، شمارش تعداد و تعیین هویت باکتری ها، تست های حساسیت دارویی و تست های مولکولی تاییدی ((16S rDNA PCR بر روی تمامی نمونه ها انجام گردید و ارتباط های آماری با استفاده از نرم افزار SPSS version 13 در پایان مورد ارزیابی قرار داده شد. وجود شمارش بیش از هزار باکتری در هر نمونه بعنوان شاهدی بر کلنیزاسیون پایدار در نظر گرفته شد.
از میان(41.1%)42 نمونه کشت مثبت، 59 جدایه باکتریایی با استفاده از روش کشت جداسازی گردید، به علاوه در 7 نمونه از میان نمونه های کشت منفی نیز حضور DNAباکتریایی توسط روش مولکولی نشان داده شد. بیشترین نوع سنگ ها به ترتیب مربوط به سنگ کلسترولی، پیگمانته سیاه و پیگمانته قهوه ای و بیشترین ایزوله های جداسازی شده در این بیماران باکتری های اشرشیا کلی(34.4%)، انتروکوکوس(19.7%)، کلبسیلا پنومونیه (18%) و سودوموناس ائروژینوزا(18%) بودند. بین نوع سنگ، نوع باکتری کشت شده و بیماری های تحت بررسی در این بیماران ارتباط معناداری دیده نشد. داشتن سابقه مصرف آنتی بیوتیک در این بیماران مبتلا یه سنگ صفراوی(44.6%) بطور معنادار بیش از سایر مشکلات صفراوی بود((P=0.01.
وجود باکتری در 41.1% نمونه های صفراوی می تواند دلیلی بر نقش آنها در پاتوژنز بیماری های صفراوی باشد. اشرشیا کلی و انتروکوکها از شایعترین این عوامل می باشند. مطالعه بیشتر بر روی توان بیماریزایی و اثرات پاتوفیزیولوژیک این باکتری ها خواهد توانست به روشن تر شدن نقش باکتری ها در ایجاد سنگهای صفراوی کمک نماید.

یکی از مشکلات مهم بیمارستانها مقاومت باکتری های بیماری زا به مواد ضد میکروبی می باشد، این معضل سبب افرایش هزینه های درمان، افزایش موارد شکست درمانی و در نهایت مرگ بیماران می گردد. هدف از این تحقیق شناسایی باسیل های گرم منفی بیماری زای مقاوم به آنتی بیوتیکهای بتالاکتام با طیف گسترده و بررسی تاثیر نانو ذره نقره بر روی آنها می باشد.
از کشت 276نمونه بالینی از بیماران مراجعه کننده به سه بیمارستان (غرضی، سینا و الزهراء) شهر اصفهان طی 8 ماه سال 1389 جمعا 186 باسیل گرم منفی جدا شد. این باکتری ها از نظر تولید آنزیم بتالاکتاماز با طیف گسترده (ESBLs) به روش دیسک دیفیوژن مورد بررسی قرار گرفته و تست تائیدی آن با استفاده از روش(Double Disk approximation Test، DDT) انجام شد. باسیلهای مولد ESBLs تحت تاثیر غلظت های، 500 400و200، 100، 50، 25، 5/12 ppm نانو ذره نقره تهیه شده از شرکت نانو نصب پارس تهران مختلف قرار گرفت و قطر هاله عدم رشد در آنها اندازه گیری شد.
3 140(3/75%) نمونه از باسیل گرم منفی مولد ESBLs بوده و 46 نمونه (7/24%) باسیل های گرم منفی غیر ESBL بودند. بیشترین نمونه آلوده باسیل های گرم منفی دارای ESBL، مربوط به نمونه های عفونی ادرار و شایع ترین باکتری جداسازی شده کلبسیلا پنمونیه بود. تمامی نمونه ها نسبت به محلول نانو ذرات نقره با غلظت ppm100 حساس بودند. انتروباکتر ائروژنز و (24 میلی متر) و سودوموناس ائروژینوزا(23 میلی متر) بالاترین قطر هاله عدم رشد را در حضور غلظت 500ppm نانو ذره نقره نشان دادند. یافته های حاصل نشان می دهد نانو ذره نقره می تواند اثر مهاری بر تمامی باسیلهای گرم منفی مورد آزمون داشته باشد و با افزایش غلظت نانو ذرات نقره، قطر هاله ی عدم رشد باسیل های گرم منفی دارای ESBL نیز افزایش می یابد.

فرآیندهای فتوکاتالیستی یک تکنولوژی جدید با کاربردهای فراوان می باشند. امروزه این فرآیندها به خصوص در بخش تصفیه آب، در حال تحقیق و توسعه هستند. هدف از انجام این تحقیق تعیین حذف فتوکاتالیستی اشریشیاکلی از آب با استفاده از اشعه UV-C در حضور نانو ذرات اکسید روی(ZnO) سنتز شده می باشد.
پس از سنتز نانو ذرات ZnO ویژگی های نانو ذرات با استفاده از میکروسکوپ الکترونی SEM و روش تفرق اشعه X تعیین گردید. نمونه آب آلوده به 102 تا 103 عدد باکتری در میلی لیتر تهیه گردید. آب آلوده به اشریشیاکلی وارد رآکتور فتوکاتالیستی شد و کارایی حذف باکتری در شرایط مختلف pH (5/5، 7و9)، زمان ماند (10، 20، 30، 40، 50 و 60 دقیقه)، غلظت نانو ذرات ZnO (2/0، 4/0، 8/0 و 1 گرم بر لیتر)، تعداد باکتری (102 و 103 عدد در میلی لیتر) و ولتاژ 27 ولت لامپ C - UV مورد بررسی قرار گرفت.
کارایی رآکتور با افزایش زمان ماند و غلظت نانوذرات ZnO در حضور نور UV افزایش یافت. نتایج نشان داد که بهترین شرایط حذف باکتری با تعداد 102 و 103 عدد در میلی لیتر، در pH=7، مدت زمان 30 دقیقه و غلظت 8/0 گرم بر لیتر نانو ذرات ZnO در حضور نور UV با ولتاژ 27 ولت بوده و کارائی روش به ترتیب حدود 99% و 100% به دست آمد.
تحقیق نشان داد که زمان ماند و افزایش غلظت نانو ذرات ZnO در حضور نور UV بیشترین تاثیر را در عملکرد فرآیند فتوکاتالیست داشته است. یافته های تحقیق نشان می دهد که فرآیند فتوکاتالیست روشی امید بخش در حذف اشریشیاکلی از آب آشامیدنی است.

ماست یک محصول شیری تخمیرشده نیمه جامد است که دراثرمیکروارگانیسم های آغاز گر بوجود می آید این میکروارگانیسم ها را تحت عنوان باکتری های اسیدلاکتیک می نامند که مسئول تشکیل بافت، عطر و طعم موجود در ماست بوده و همچنین در دستگاه گوارش انسان عامل حفظ سلامتی انسان می باشد. هدف از این مطالعه شمارش تعداد میکرو ارگانیسم های مفید ماستهای سنتی روستاهای استان آذربایجان شرقی بود.
در این تحقیق 90 نمونه ماست سنتی از روستاهای نسبتا دور از مراکز شهری استان آذربایجان شرقی جمع آوری و در شرایط استاندارد به آزمایشگاه مرکز تحقیقات کاربردی دارویی دانشگاه علوم پزشکی تبریز منتقل گردید. برای اندازه گیری تعداد لاکتوباسیل ها از رقت 6- 10 نمونه های ماست در محیط MRS آگار جامد (Merck) به منظورشمارش مخمرها واز رقت 3- 10 ماست در محیط سابرو دکستروز آگار(Merck) تلقیح شد. کلنی ها رشد کرده شمارش و نوع باکتری با تستهای بیوشیمیائی تعیین گردید.
در این بررسی میانگین تعداد لاکتوباسیل ها در هرمیلی لیتر از ماست های سنتی حدود cfu/ml 106× 62 و تعداد مخمرها cfu/ml 104 ×41 تعیین گردید. لاکتوباسیلوس دلبروکی، ل. پلانتاروم از فراوانترین انواع لاکتوباسیل ها و ساکارمایسس سروزیه شایعترین مخمر جدا شده بود. بر اساس یافته های حاصل از این تحقیق تعداد میکروارگانیسم ها از جمله میکروبهای مفید بطور قابل ملاحظه در ماست های سنتی روستاهای استان آذربایجانشرقی دیده شدند. بنابراین می توان در آینده از آنها بعنوان استارتر و پروبیوتیک در کارنجات لبنیات و شیر برای تولید محصولات مطلوب استفاده کرد.

گلوکز6 فسفات دهیدروژناز، G6PD، از آنزیم های مسیر پنتوزفسفات است. حدود 3% مردم جهان به کمبود این آنزیم وابسته به جنس مبتلا هستند. ژن آنزیم G6PD روی کروموزوم X واقع است. کمبود آنزیم می تواند یکی از عوامل زردی و آنمی همولیتیک در نوزادان باشد. هدف از این مطالعه تعیین شیوع کمبود این آنزیم در نوزادان مراجعه کننده به آزمایشگاه غربالگری استان سمنان می باشد.
در این مطالعه مقطعی، از سال 1386 تا 1389 بر اساس برنامه مدون کشوری و در راستای انجام تستهای غربالگری نوزادان، از پاشنه پا نوزادان 3 تا 5 روزه نمونه خون گرفته شد. ارزیابی آنزیم به روش تست فلورسانت لکه ای (Fluorescent Spot Test) سریع و توسط کیت شرکت” کیمیا پژوهان- ایران “انجام شد. مقایسه شیوع نقص آنزیمی در نوزادان دختر و پسر با استفاده از تست آماری X2 انجام شد و P<0.05 معنی دار درنظر گرفته شد.
از تعداد 9353 نوزاد مراجعه کننده به آزمایشگاه غربالگری مرکز بهداشت دانشگاه علوم پزشکی سمنان با تفکیک جنسی (51.53%) 4820 پسرو (48.47%)4533 دختر، تعداد (3.2%) 300مورد به کمبود آنزیم مبتلا بودند که از این افراد تعداد 263(5.45%) نفر پسر و (0.81%) 37 نفر دختر بودند. این نسبت در پسران به دختران 7 به 1 می باشد.
شیوع کمبود آنزیم G6PD در استان سمنان 3.2% تعیین گردید و فراوانی کمبود این آنزیم همانگونه که انتظار میرفت در نوزادان پسر بیش از دختران است.