انتخاب اختصاصی فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی به کمک پروتئین A در تکنیک کتابخانه آنتی بادی فاژ

تکنیک کتابخانه آنتی بادی فاژ یکی از قدرتمندترین روش های ساخت قطعات آنتی بادی در محیط آزمایشگاه است. با این حال یکی از مشکلات تکنیکی در مسیر انتخاب آنتی بادی های اختصاصی و عملکردی وجود فاژهای فاقد قطعه آنتی بادی در کتابخانه آنتی بادی فاژ است. هدف از این مطالعه استفاده از قابلیت اتصال کلون های موجود در کتابخانه آنتی بادی فاژ به پروتئین A برای خالص سازی فیزیکی فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی از فاژهای فاقد قطعه آنتی بادی است.
کتابخانه آنتی بادی فاژ Tomlinson طبق پروتکل مربوطه تکثیر شد. انتخاب آنتی بادی علیه گیرنده HER2 در سطح سلول VERO انجام شد. سه چرخه panning در دو گروه صورت گرفت به صورتی که در یک گروه قبل از هر چرخه panning فاژهای تولید شده به وسیله پروتئین A متصل به آگاروز خالص سازی شدند، در حالی که در گروه کنترل مرحله خالص سازی با پروتئین A صورت نگرفت. آنتی بادی های به دست آمده در انتهای هر چرخه در دو گروه مورد مطالعه به وسیله PCR و phage-ELISA مورد ارزیابی قرار گرفت.
نتایج آزمون PCR نشان دهنده افزایش قابل ملاحظه تعداد فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی پس از خالص سازی توسط پروتئین A در انتهای چرخه سوم panning) 87 درصد) نسبت به گروه کنترل (41 درصد) است. بعلاوه نتایج آزمون الیزا نیز تایید انتخاب و تکثیر اختصاصی آنتی بادی در گروه فاژ خالص شده با پروتئین A است.
این مطالعه اهمیت خالص سازی فاژهای حاوی قطعه آنتی بادی را برای تولید و انتخاب آنتی بادی های اختصاصی را در تکنیک کتابخانه آنتی بادی فاژ نشان می دهد.